人肝癌細(xì)胞
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產(chǎn)品中文名稱(chēng)：人肝癌細(xì)胞
產(chǎn)品英文名稱(chēng)：BEL-7402
參考用途：/
形態(tài)特性：上皮細(xì)胞樣，短梭形，多角形,，邊緣不規(guī)則，單層貼壁生長(zhǎng)
培養(yǎng)基：RPMI-1640完全培養(yǎng)基：90%RPMI-1640+10%FBS
培養(yǎng)條件：培養(yǎng)溫度37℃,；氣體環(huán)境5%CO2+95%空氣,；
培養(yǎng)方法：復(fù)蘇步驟：①凍存管從液氮或-80℃中取出放入 PE 手套中，迅速?zèng)]入 37℃水浴鍋,，搖晃凍存管加速溶解,，以 1 分鐘內(nèi)全部 溶解為宜；②在超凈臺(tái)中將溶解好的細(xì)胞液加入到裝有 9ml 完全培養(yǎng)基的離心管內(nèi),，1000-1200rpm/min 離心 5 分鐘,，棄去 上清液，用 1-2mL 完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,。③然后將細(xì)胞懸液加入到含有 5-6mL 完全培養(yǎng)基的 T25 瓶中,，放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)。 細(xì)胞傳代：①將舊培養(yǎng)液吸除,，PBS 清洗兩遍后,，加入 1-2mL 胰酶（0.25%Trypsin+0.02%EDTA）；②鏡下觀察消化情況,， 在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動(dòng)時(shí)（可用吸管吸起些許胰酶輕輕吹打細(xì)胞層某處,，肉眼可見(jiàn)細(xì)胞層脫落,，即消化完成，否則繼續(xù) 消化）,，直接吸掉胰酶,，加入 5-6 毫升完全培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層,，把細(xì)胞層吹落,，吹散,。③將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到 新的 T25 瓶中，添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基,，把細(xì)胞懸液打勻,，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。④注意培養(yǎng)基 pH 值變化和細(xì)胞密度,，定期換 液（每周 2-3 次）,，待細(xì)胞密度達(dá)到 80%-90%時(shí)，重復(fù)傳代操作或者凍存,。
存儲(chǔ)形式：液氮
提供形式：凍存管,；T25培養(yǎng)瓶
備注：BEL-7402細(xì)胞株是1974年從臨床肝癌手術(shù)標(biāo)本中建立的。 細(xì)胞群體倍增時(shí)間為20小時(shí),。 移植到處理過(guò)的wistar大鼠中的能形成腫瘤結(jié)節(jié),。 細(xì)胞形態(tài)呈上皮樣細(xì)胞。 在電子顯微鏡下亦顯示上皮細(xì)胞所具有的橋粒和張力原纖維,，與臨床肝癌細(xì)胞相似,。 分瓶培養(yǎng)第四天時(shí)，其有絲分裂指數(shù)約為7%,。 BEL-7402細(xì)胞的染色體數(shù)為不足三倍體,，有一個(gè)異常的近端著絲點(diǎn)染色體。 間接免疫熒光法測(cè)BEL-7402細(xì)胞內(nèi)的AFP為陽(yáng)性反應(yīng),。 LDH同工酶譜顯示與成年人肝細(xì)胞不同,，而與人胚肝及臨床肝癌相近。 有問(wèn)題的細(xì)胞系：被污染,。顯示為 HeLa 衍生物 (PubMed= 28807831 ),。最初被認(rèn)為來(lái)自一名患有肝細(xì)胞癌的 53 歲男性患者。注冊(cè)：國(guó)際細(xì)胞系認(rèn)證委員會(huì),，錯(cuò)誤識(shí)別細(xì)胞系登記,；ICLAC-00549。
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