阪崎腸桿菌ITS序列檢測質(zhì)粒DNA標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)/GBW(E)100307_單標(biāo)_基質(zhì)類_標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)_萘析商城

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阪崎腸桿菌ITS序列檢測質(zhì)粒DNA標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)/GBW(E)100307

GBW(E)100307

Plasmid DNA Reference Materials for Enterobacter sakazakii ITS sequences detection

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1.5mL離心管

上海計量院

75.1 ng/μL

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阪崎腸桿菌ITS序列檢測質(zhì)粒DNA標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)/GBW(E)100307介紹：

物質(zhì)英文名稱: Plasmid DNA Reference Materials for Enterobacter sakazakii ITS sequences detection
物質(zhì)名稱: 阪崎腸桿菌ITS序列檢測質(zhì)粒DNA標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)
標(biāo)物編號: GBW(E)100307
規(guī)格: 1.5mL離心管
標(biāo)準(zhǔn)值: 75.1 ng/μL
存儲要求: 冷凍
特殊要求:
保質(zhì)期: 12個月
有效期: 2026-04
不確定度: rel=2.8%(=2)

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相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)解讀：《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗阪崎腸桿菌檢驗》

1. 適用范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了食品中阪崎腸桿菌（Cronobacter sakazakii）的檢驗方法，適用于嬰幼兒配方食品、乳制品及其他可能污染阪崎腸桿菌的食品樣品檢測。標(biāo)準(zhǔn)涵蓋傳統(tǒng)培養(yǎng)法、PCR快速檢測及生化確認(rèn)方法。

2. ITS序列檢測關(guān)聯(lián)內(nèi)容

靶基因選擇	標(biāo)準(zhǔn)附錄B規(guī)定了PCR檢測方法，明確使用ITS（16S-23S rRNA基因間隔區(qū)）作為特異性靶標(biāo)序列，引物設(shè)計覆蓋阪崎腸桿菌保守區(qū)域。
質(zhì)粒DNA用途	標(biāo)準(zhǔn)要求使用含有ITS序列的重組質(zhì)粒作為陽性對照，用于驗證PCR體系有效性，質(zhì)粒濃度應(yīng)≥10³ copies/μL。

3. 方法學(xué)參數(shù)

項目	參數(shù)要求
檢出限	培養(yǎng)法：1 CFU/100g（經(jīng)過增菌后） PCR法：10² copies/g（直接檢測）
特異性	引物對阪崎腸桿菌ITS區(qū)域100%匹配，與近源腸桿菌科細(xì)菌無交叉反應(yīng)
質(zhì)控要求	每批次檢測需包含陰性對照（無菌水）和陽性對照（質(zhì)粒DNA）

4. 實驗流程要點

1.	樣品前處理：按1:10比例進(jìn)行緩沖蛋白胨水預(yù)增菌
2.	DNA提取：增菌液需經(jīng)煮沸法或試劑盒提取核酸
3.	PCR擴(kuò)增：退火溫度設(shè)定為55±1℃，循環(huán)數(shù)不超過35次
4.	結(jié)果判定：陽性對照質(zhì)粒應(yīng)出現(xiàn)224bp特異性條帶

5. 方法驗證要求

使用質(zhì)粒DNA標(biāo)準(zhǔn)品時需滿足：
① 質(zhì)粒線性化處理確保擴(kuò)增效率
② 濃度標(biāo)定需通過紫外分光光度法和實時熒光定量PCR雙重驗證
③ 長期保存應(yīng)置于-70℃以下，避免反復(fù)凍融

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