25-羥基維生素-D2同位素_單標(biāo)_同位素_標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)_萘析商城

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25-羥基維生素-D2同位素

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25-羥基維生素-D2同位素介紹：

25-羥基維生素-D2同位素

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標(biāo)準(zhǔn)名稱及標(biāo)準(zhǔn)號(hào)

GB/T 39542-2020 人血清中25-羥基維生素D的測(cè)定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法

適用范圍

本標(biāo)準(zhǔn)適用于人血清或血漿中25-羥基維生素D（包括D2和D3）的定量檢測(cè)，適用于臨床診斷和營養(yǎng)研究領(lǐng)域。方法采用同位素內(nèi)標(biāo)法（如25-羥基維生素D2同位素），確保檢測(cè)準(zhǔn)確性。

核心檢測(cè)方法

采用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法（LC-MS/MS），結(jié)合同位素內(nèi)標(biāo)校正技術(shù)。樣品經(jīng)蛋白沉淀、液液萃取或固相萃取凈化后，通過C18色譜柱分離，質(zhì)譜儀在多重反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM）模式下進(jìn)行定量分析。

檢出限與定量限

25-羥基維生素D2的檢出限（LOD）為0.1 ng/mL，定量限（LOQ）為0.3 ng/mL。同位素內(nèi)標(biāo)法可顯著降低基質(zhì)干擾，提升定量可靠性。

質(zhì)控樣品要求

1. 每批次檢測(cè)需包含空白樣品、校準(zhǔn)曲線及質(zhì)控樣（低、中、高濃度）
2. 質(zhì)控樣品的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）應(yīng)≤15%
3. 同位素內(nèi)標(biāo)回收率應(yīng)控制在85%-115%之間

關(guān)鍵實(shí)驗(yàn)步驟

1. 樣品前處理：加入同位素內(nèi)標(biāo)后，使用甲醇沉淀蛋白，乙腈或甲基叔丁基醚萃取目標(biāo)物
2. 色譜條件：流動(dòng)相為甲醇-水（含甲酸銨），梯度洗脫，流速0.3 mL/min
3. 質(zhì)譜條件：電噴霧電離源（ESI+），監(jiān)測(cè)離子對(duì)為m/z 401.3→365.3（25-OH-D2）及m/z 407.3→371.3（同位素內(nèi)標(biāo)）

特別說明

1. 實(shí)驗(yàn)需在避光條件下操作，防止維生素D光解
2. 不同品牌質(zhì)譜儀需重新優(yōu)化碰撞能量參數(shù)
3. 血清樣品需-80℃保存，避免反復(fù)凍融

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