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EC肉湯（顆粒）/用于糞大腸菌群,、大腸桿菌的測定

HBKP0105

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250g

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用途：用于糞大腸菌群、大腸桿菌的測定,。

成分(g/L)：

胰蛋白胨	20.0
乳糖	5.0
氯化鈉	5.0
磷酸氫二鉀	4.0
磷酸二氫鉀	1.5
三號膽鹽	1.5
pH值 6.9±0.1	25℃

檢驗原理：胰蛋白胨提供碳氮源,；3 號膽鹽抑制革蘭氏陽性菌，特別抑制革蘭氏陽性桿菌和糞腸球菌,；乳糖是可發(fā)酵的糖類,；磷酸氫二鉀和磷酸二氫鉀為緩沖劑；氯化鈉可維持均衡的滲透壓,。

用法：稱取本品 37.0g,加熱攪拌溶解于 1000ml 蒸餾水中,分裝到有倒立發(fā)酵管的16mm*150mm試管中,每管8ml,121℃高壓滅菌 15 分鐘,備用,。

質(zhì)量控制和典型特征

在 44.5℃培養(yǎng) 24-48h,糞大腸菌群和大腸桿菌產(chǎn)生氣體,在倒立小發(fā)酵管中有氣泡。

EC肉湯中不同細菌的生長情況：

EC肉湯的原理及實驗現(xiàn)象：

EC肉湯（顆粒）微生物靈敏度試驗:按標(biāo)簽用法制備培養(yǎng)基,，接種以下質(zhì)控菌株,，放置44.5±0.2℃需氧培養(yǎng)24-48小時。

以上信息僅供參考,，請以實物批次為準(zhǔn),！

一、適用范圍

EC肉湯適用于食品,、水質(zhì)等樣品中糞大腸菌群和大腸桿菌的確證試驗,，依據(jù)國家標(biāo)準(zhǔn)GB 4789.3-2016《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗大腸菌群計數(shù)》和行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)SN/T 0169-2010《進出口食品中大腸菌群、糞大腸菌群和大腸桿菌檢測方法》,。該培養(yǎng)基通過選擇性抑制非目標(biāo)菌，適用于多管發(fā)酵法的確證培養(yǎng)[1][3],。

二,、核心檢測方法

依據(jù)GB 4789.3-2016,，采用多管發(fā)酵法：
1. 初發(fā)酵：樣品接種于乳糖膽鹽培養(yǎng)基，36℃培養(yǎng)24h,；
2. 復(fù)發(fā)酵：陽性管轉(zhuǎn)接EC肉湯,，44.5±0.2℃培養(yǎng)24-48h；
3. 產(chǎn)氣判讀：小倒管中氣體≥1/3體積為陽性,。該方法可區(qū)分普通大腸菌群與耐熱的糞大腸菌群[1][3],。

三、檢出限與定量限

1. 多管發(fā)酵法：檢出限3 MPN/g（按GB 4789.3規(guī)定）,；
2. 定量限根據(jù)接種梯度確定,，典型樣品接種量梯度為0.1g、0.01g,、0.001g,；
3. 最低定量限為1 MPN/10g（SN/T 0169標(biāo)準(zhǔn)方法）[3][5]。

四,、質(zhì)控樣品要求

1. 陽性對照：大腸埃希氏菌（CMCC 44102或ATCC 25922）,，應(yīng)產(chǎn)氣且混濁度≥2麥?zhǔn)蠁挝唬?br>2. 陰性對照：糞腸球菌（ATCC 29212），培養(yǎng)后應(yīng)無混濁及產(chǎn)氣,；
3. 空白對照：未接種培養(yǎng)基應(yīng)保持澄清,。質(zhì)控頻率每批次培養(yǎng)基至少驗證一次（參照GB/T 27405-2008）[1][3]。

五,、關(guān)鍵實驗步驟

1. 配制：37g干粉溶解于1L蒸餾水,，煮沸至完全溶解；
2. 分裝：每支試管8-10ml,，含杜氏小倒管,；
3. 滅菌：121℃高壓滅菌15min，冷卻后4℃保存?zhèn)溆茫?br>4. 接種：取初發(fā)酵陽性培養(yǎng)物1ml轉(zhuǎn)種,；
5. 培養(yǎng)：44.5±0.2℃水浴培養(yǎng)24±2h觀察,，陰性者繼續(xù)培養(yǎng)至48h[1][3][5]。

六,、特別說明

1. 溫度控制：培養(yǎng)箱需校準(zhǔn),，水浴培養(yǎng)需覆蓋液面；
2. 干擾物質(zhì)：高濃度抗生素或消毒劑殘留可能導(dǎo)致假陰性,；
3. 儲存要求：開封后需密封防潮,，有效期內(nèi)結(jié)塊不可使用；
4. 改良應(yīng)用：檢測O157:H7時需添加新生霉素（參考GB 4789.36標(biāo)準(zhǔn)）[3][5][9],。

[1] EC肉湯瓶裝顆粒培養(yǎng)基-廣東環(huán)凱生物科技有限公司 [3] EC肉湯培養(yǎng)基配制方法與實驗步驟-丁香通 [5] EC肉湯具體是做什么實驗用的 [9] EC肉湯-百科

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