大腸桿菌fliC基因檢測(cè)質(zhì)粒DNA標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)/GBW（E）100461_單標(biāo)_基質(zhì)類_標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)_萘析商城

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大腸桿菌fliC基因檢測(cè)質(zhì)粒DNA標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)/GBW（E）100461

GBW（E）100461

Plasmid DNA Reference Materials for Diarrheagenic Escherichia coli gene detection

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100μL

上海計(jì)量院

71.3ng/μL

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大腸桿菌fliC基因檢測(cè)質(zhì)粒DNA標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)/GBW（E）100461介紹：

物質(zhì)英文名稱: Plasmid DNA Reference Materials for Diarrheagenic Escherichia coli gene detection
物質(zhì)名稱: 大腸桿菌fliC基因檢測(cè)質(zhì)粒DNA標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)
標(biāo)物編號(hào): GBW（E）100461
規(guī)格: 100μL
標(biāo)準(zhǔn)值: 71.3ng/μL
存儲(chǔ)要求: 冷凍
特殊要求:
保質(zhì)期: 12個(gè)月
有效期: 2026-03
不確定度: 6.8%

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標(biāo)準(zhǔn)名稱

GBW（E）100461 大腸桿菌fliC基因檢測(cè)質(zhì)粒DNA標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)相關(guān)檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)

適用范圍

適用于食品、環(huán)境及臨床樣本中大腸桿菌fliC基因的分子檢測(cè)，涵蓋實(shí)時(shí)熒光定量PCR（qPCR）方法的建立、驗(yàn)證及實(shí)驗(yàn)室質(zhì)控流程。

核心檢測(cè)方法

基于TaqMan探針的實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)，靶標(biāo)基因?yàn)閒liC特異性片段，引物及探針設(shè)計(jì)需符合NCBI數(shù)據(jù)庫(kù)比對(duì)結(jié)果，擴(kuò)增效率要求90%-110%。

檢出限與定量限

最低檢出限（LOD）為10拷貝/反應(yīng)，定量限（LOQ）為50拷貝/反應(yīng)，需通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線驗(yàn)證線性范圍（10^1-10^6拷貝/μL）。

質(zhì)控樣品要求

每批次實(shí)驗(yàn)須包含陰性對(duì)照（無(wú)模板對(duì)照）、陽(yáng)性對(duì)照（含fliC基因的質(zhì)粒標(biāo)準(zhǔn)品）及過(guò)程對(duì)照（樣本提取試劑對(duì)照），確保無(wú)污染且擴(kuò)增特異性。

關(guān)鍵實(shí)驗(yàn)步驟

1. DNA提取：采用磁珠法或試劑盒法，滿足A260/A280比值1.8-2.0；
2. 反應(yīng)體系配制：嚴(yán)格分區(qū)操作防止交叉污染；
3. 擴(kuò)增程序：95℃預(yù)變性3分鐘，隨后45個(gè)循環(huán)（95℃ 15秒，60℃ 30秒）。

特別說(shuō)明

1. 需定期驗(yàn)證引物探針特異性，避免非靶標(biāo)擴(kuò)增；
2. 標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)開(kāi)封后需分裝保存于-20℃，避免反復(fù)凍融；
3. 實(shí)驗(yàn)環(huán)境應(yīng)符合生物安全二級(jí)（BSL-2）要求。

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