pRSETA
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1-tert-butyl 3-Methyl 3-aMinopyrrolidine-1,3-dicarboxylate
Y46147-250mg | 97%
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磷鎢酸鈉 水合物
Y33866-5g | AR
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4-(4-吡啶基)嗎啉
Y33018-25g | 98%
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1-苯甲基靛紅
Y22530-5g | 97%
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1-苯甲基靛紅
Y22530-250mg | 97%
產(chǎn)品中文名稱(chēng)：pRSETA
產(chǎn)品英文名稱(chēng)：pRSETA
參考用途：蛋白表達(dá)
形態(tài)特性：/
培養(yǎng)基：酵母膏：5.0,，蛋白胨：10.0，NaCl：10.0，pH：7.0(25℃)
培養(yǎng)條件：LB +氨芐青霉素,，37℃（克隆菌株DH5a）
培養(yǎng)方法：1.溶解： 收到質(zhì)粒干粉后，請(qǐng)加入 20μl 無(wú)菌水至管底,，溶解質(zhì)粒,，室溫靜置 1min； 2.混合（吸附質(zhì)粒）： 200μl 感受態(tài)細(xì)胞 + 質(zhì)粒 DNA 5~10µl 混勻,，冰上放置 30min,； 3.熱激導(dǎo)入： 42℃靜置 90s； 4.收縮膜孔： 冰浴 2min,； 5.修復(fù)培養(yǎng)： 毎管加 800µl LB 液體培養(yǎng)基,，37 ℃培養(yǎng) 1h 150 r/min,； 6.篩選培養(yǎng)： 將適當(dāng)體積（100 µl）的復(fù)蘇細(xì)胞，涂布在相應(yīng)抗性的 LB 平板上,，正置平皿 30min（瓊脂面務(wù)必干燥后）,， 倒置培養(yǎng) 12-16h，出現(xiàn)菌落,。 7.提?。?挑取單克隆菌落至相應(yīng)抗性 LB 液體培養(yǎng)基中，震蕩培養(yǎng) 12-16h,，根據(jù)試驗(yàn)需要提取質(zhì)粒,。
存儲(chǔ)形式：2-8℃
提供形式：質(zhì)粒干粉
備注：pRSET A載體是從pUC的載體衍生而來(lái)，載體設(shè)計(jì)的目的是為了在大腸桿菌中高水平的表達(dá)和純化目的克隆基因,。載體上的T7啟動(dòng)子使得pRSETA載體高水平表達(dá)克隆的基因序列成為可能,。此外，DNA插入片段的位于載體上面的下游側(cè),，并能夠上游的蛋白編碼框相一致,，上游的編碼序列表達(dá)了一個(gè)N-端融合的肽。該序列包括一個(gè)ATG翻譯起始密碼子,，一個(gè)6 X His標(biāo)簽,，一個(gè)來(lái)源于噬菌體T7基因10的轉(zhuǎn)錄穩(wěn)定序列，Xpress抗原表位,，以及一個(gè)腸激酶裂解識(shí)別序列,。His 標(biāo)簽允許簡(jiǎn)單的Ni柱蛋白純化。腸激酶識(shí)別位點(diǎn)位于His標(biāo)簽和重組蛋白之間,，可以隨后方便的去除重組蛋白的N-端的融合肽,。
以上信息僅供參考，請(qǐng)以實(shí)物批次為準(zhǔn),！