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大腸埃希氏菌8099染菌玻片 A0210

CICC A0210

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食品中致瀉大腸埃希氏菌檢測(cè) MPCR-DHPLC法

適用范圍	適用于食品中致瀉大腸埃希氏菌的定性檢測(cè)，包括產(chǎn)腸毒素型、腸致病型、腸侵襲型、腸出血型及腸集聚型等五類(lèi)致瀉性大腸埃希氏菌的快速篩查[1]。
核心檢測(cè)方法	多重PCR（MPCR）結(jié)合變性高效液相色譜（DHPLC）技術(shù)，通過(guò)特異性引物擴(kuò)增目標(biāo)基因片段，利用DHPLC進(jìn)行快速分離和鑒定[1]。
檢出限與定量限	該方法對(duì)食品樣本中致瀉大腸埃希氏菌的檢測(cè)靈敏度為103 CFU/g，定量限需結(jié)合具體樣本基質(zhì)進(jìn)行驗(yàn)證[1]。
質(zhì)控樣品要求	需包含陽(yáng)性對(duì)照（已知致瀉大腸埃希氏菌標(biāo)準(zhǔn)菌株）和陰性對(duì)照（非目標(biāo)菌或無(wú)菌樣本），每批次檢測(cè)需同步運(yùn)行質(zhì)控樣本[1]。
關(guān)鍵實(shí)驗(yàn)步驟	1. 樣本前處理與增菌培養(yǎng)； 2. 基因組DNA提取； 3. 多重PCR擴(kuò)增； 4. DHPLC分析擴(kuò)增產(chǎn)物； 5. 結(jié)果判讀與數(shù)據(jù)分析[1]。
特別說(shuō)明	需注意交叉污染風(fēng)險(xiǎn)，實(shí)驗(yàn)環(huán)境應(yīng)符合二級(jí)生物安全實(shí)驗(yàn)室要求；DHPLC參數(shù)需根據(jù)目標(biāo)基因片段特性?xún)?yōu)化[1]。

出口食品中致瀉大腸埃希氏菌檢測(cè)方法基因芯片法

適用范圍	適用于出口食品中五類(lèi)致瀉大腸埃希氏菌（ETEC、EPEC、EIEC、EHEC、EAEC）的高通量檢測(cè)，特別適用于大規(guī)模樣本篩查[1]。
核心檢測(cè)方法	基于基因芯片技術(shù)，通過(guò)設(shè)計(jì)特異性探針與目標(biāo)基因雜交，結(jié)合熒光信號(hào)分析實(shí)現(xiàn)多靶標(biāo)同步檢測(cè)[1]。
檢出限與定量限	檢測(cè)限為102 CFU/g，定量分析需通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)法確定，需驗(yàn)證不同食品基質(zhì)的干擾效應(yīng)[1]。
質(zhì)控樣品要求	需包含空白對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照（含所有目標(biāo)基因型菌株）及內(nèi)標(biāo)（如管家基因），每芯片應(yīng)設(shè)置重復(fù)點(diǎn)樣[1]。
關(guān)鍵實(shí)驗(yàn)步驟	1. 樣本預(yù)處理與選擇性增菌； 2. DNA提取與標(biāo)記； 3. 基因芯片雜交； 4. 熒光掃描與數(shù)據(jù)解析； 5. 結(jié)果復(fù)核與報(bào)告生成[1]。
特別說(shuō)明	芯片批次間需進(jìn)行重復(fù)性驗(yàn)證；熒光信號(hào)閾值應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)條件動(dòng)態(tài)調(diào)整；需定期更新探針數(shù)據(jù)庫(kù)以覆蓋新變異株[1]。

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