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適用范圍	適用于食品中致瀉大腸埃希氏菌的定性檢測,，包括產(chǎn)腸毒素型、腸致病型,、腸侵襲型,、腸出血型及腸集聚型等五類致瀉性大腸埃希氏菌的快速篩查[1]。
核心檢測方法	多重PCR（MPCR）結(jié)合變性高效液相色譜（DHPLC）技術(shù),，通過特異性引物擴增目標(biāo)基因片段,，利用DHPLC進行快速分離和鑒定[1]。
檢出限與定量限	該方法對食品樣本中致瀉大腸埃希氏菌的檢測靈敏度為103 CFU/g,，定量限需結(jié)合具體樣本基質(zhì)進行驗證[1],。
質(zhì)控樣品要求	需包含陽性對照（已知致瀉大腸埃希氏菌標(biāo)準(zhǔn)菌株）和陰性對照（非目標(biāo)菌或無菌樣本），每批次檢測需同步運行質(zhì)控樣本[1],。
關(guān)鍵實驗步驟	1. 樣本前處理與增菌培養(yǎng),； 2. 基因組DNA提取,； 3. 多重PCR擴增,； 4. DHPLC分析擴增產(chǎn)物； 5. 結(jié)果判讀與數(shù)據(jù)分析[1],。
特別說明	需注意交叉污染風(fēng)險,，實驗環(huán)境應(yīng)符合二級生物安全實驗室要求；DHPLC參數(shù)需根據(jù)目標(biāo)基因片段特性優(yōu)化[1],。

適用范圍	適用于出口食品中五類致瀉大腸埃希氏菌（ETEC,、EPEC、EIEC,、EHEC,、EAEC）的高通量檢測，特別適用于大規(guī)模樣本篩查[1],。
核心檢測方法	基于基因芯片技術(shù),，通過設(shè)計特異性探針與目標(biāo)基因雜交,，結(jié)合熒光信號分析實現(xiàn)多靶標(biāo)同步檢測[1]。
檢出限與定量限	檢測限為102 CFU/g,，定量分析需通過標(biāo)準(zhǔn)曲線法確定,，需驗證不同食品基質(zhì)的干擾效應(yīng)[1]。
質(zhì)控樣品要求	需包含空白對照,、陽性對照（含所有目標(biāo)基因型菌株）及內(nèi)標(biāo)（如管家基因）,，每芯片應(yīng)設(shè)置重復(fù)點樣[1]。
關(guān)鍵實驗步驟	1. 樣本預(yù)處理與選擇性增菌,； 2. DNA提取與標(biāo)記,； 3. 基因芯片雜交； 4. 熒光掃描與數(shù)據(jù)解析,； 5. 結(jié)果復(fù)核與報告生成[1],。
特別說明	芯片批次間需進行重復(fù)性驗證；熒光信號閾值應(yīng)根據(jù)實驗條件動態(tài)調(diào)整,；需定期更新探針數(shù)據(jù)庫以覆蓋新變異株[1],。

大腸埃希氏菌8099染菌玻片/消毒技術(shù)規(guī)范