狗腎細(xì)胞
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產(chǎn)品中文名稱：狗腎細(xì)胞
產(chǎn)品英文名稱：Super Tube
參考用途：/
形態(tài)特性：上皮細(xì)胞樣,，短梭形,，邊緣不規(guī)則，單層貼壁生長(zhǎng),，背景干凈,，不產(chǎn)色素，無空泡
培養(yǎng)基：90%DMEM-H/F12+10%FBS
培養(yǎng)條件：37℃,；5%CO2+95%空氣,；
培養(yǎng)方法：復(fù)蘇步驟：①凍存管從液氮或-80℃冰箱中取出放入PE手套中，迅速?zèng)]入37℃水浴鍋,，搖晃凍存管加速溶解,，以1min內(nèi)全部溶解為宜；②在超凈臺(tái)中將溶解好的細(xì)胞液加入到裝有9mL完全培養(yǎng)基的離心管內(nèi),，1000-1200rpm離心5min,，棄去上清液，用1-2mL完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,。③將細(xì)胞懸液加入到含有5-6mL完全培養(yǎng)基的T25瓶中,，放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
細(xì)胞傳代：①將舊培養(yǎng)液吸除,，PBS清洗兩遍后,，加入1-2mL胰酶（0.25%Trypsin+0.02%EDTA）；②鏡下觀察消化情況,，在細(xì)胞邊緣縮小,，貼壁松動(dòng)時(shí)（可用吸管吸起些許胰酶輕輕吹打細(xì)胞層某處，肉眼可見細(xì)胞層脫落,，即消化完成,，否則繼續(xù)消化），直接吸掉胰酶,，加入5-6mL完全培養(yǎng)基,，輕輕吹打細(xì)胞層，把細(xì)胞層吹落,，吹散,。③將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的T25瓶中，添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻,，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。；④注意培養(yǎng)基pH值變化和細(xì)胞密度,，定期換液（每周2-3次）,，待細(xì)胞密度達(dá)到80%-90%時(shí)，重復(fù)傳代操作或者凍存,。
存儲(chǔ)形式：液氮
提供形式：凍存管,；T25培養(yǎng)瓶
備注：‖動(dòng)物種別│狗‖性別│雌‖描述│從表觀正常的成年雌性可卡犬中建立了細(xì)胞株MDCK (ATCC CCL-34)，從中克隆建立了狗上皮樣細(xì)胞株Super Tube,。 當(dāng)維持高細(xì)胞濃度時(shí),，Super tube形成大量的小管(據(jù)報(bào)道，24孔板的每孔鋪7x105細(xì)胞,，３天內(nèi)就能形成小管),。 要形成小管，細(xì)胞需要每天兩次換液以提供足夠養(yǎng)分,。 與原始細(xì)胞株相比,，Super Tube的c-AMP的檢測(cè)水平低得多,，在forskolin刺激下讀出的腺苷環(huán)化酶水平也低,；它的跨上皮抗性也比Super Dome (ATCC CRL- 2286) 和 MDCK都低。 在本庫通過支原體檢測(cè),。
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