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小鼠成纖維細(xì)胞

BNCC100314

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凍存管,；T25培養(yǎng)瓶

北納生物/BNCC

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小鼠成纖維細(xì)胞介紹：

產(chǎn)品中文名稱：小鼠成纖維細(xì)胞
產(chǎn)品英文名稱：L929[NCTC clone 929]
參考用途：1948年三月建立了NCTC clone 929(小鼠結(jié)締組織)，細(xì)胞系L的克隆,。細(xì)胞系L是最早建立的連續(xù)培養(yǎng)細(xì)胞系之一,，而clone 929是最早的克隆株。從一只100日齡的雄性C3H/An小鼠的正常皮下疏松結(jié)締組織入脂肪組織中建立了親本細(xì)胞系L,。第95代的細(xì)胞系L使用毛細(xì)管法分離單細(xì)胞建立了clone929,。檢測發(fā)現(xiàn)鼠痘病毒陰性。
形態(tài)特性：成纖維細(xì)胞樣，多角形,，邊緣不規(guī)則,，單層貼壁生長
培養(yǎng)基：EMEM完全培養(yǎng)基：90%EMEM+10%FBS
培養(yǎng)條件：37℃；5%CO2+95%空氣,；
培養(yǎng)方法：復(fù)蘇步驟：①凍存管從液氮或-80℃冰箱中取出放入PE手套中，迅速沒入37℃水浴鍋,，搖晃凍存管加速溶解,，以1min內(nèi)全部溶解為宜；②在超凈臺中將溶解好的細(xì)胞液加入到裝有9mL完全培養(yǎng)基的離心管內(nèi),，1000-1200rpm離心5min,，棄去上清液，用1-2mL完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,。③將細(xì)胞懸液加入到含有5-6mL完全培養(yǎng)基的T25瓶中,，放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
細(xì)胞傳代：①將舊培養(yǎng)液吸除,，PBS清洗兩遍后,，加入1-2mL胰酶（0.25%Trypsin+0.02%EDTA）；②鏡下觀察消化情況,，在細(xì)胞邊緣縮小,，貼壁松動時（可用吸管吸起些許胰酶輕輕吹打細(xì)胞層某處，肉眼可見細(xì)胞層脫落,，即消化完成,，否則繼續(xù)消化），直接吸掉胰酶,，加入5-6mL完全培養(yǎng)基,，輕輕吹打細(xì)胞層，把細(xì)胞層吹落,，吹散,。③將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的T25瓶中，添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基,，把細(xì)胞懸液打勻,，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。,；④注意培養(yǎng)基pH值變化和細(xì)胞密度,，定期換液（每周2-3次），待細(xì)胞密度達(dá)到80%-90%時,，重復(fù)傳代操作或者凍存,。
存儲形式：液氮
提供形式：凍存管；T25培養(yǎng)瓶
備注：/

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