小鼠乳腺癌細胞
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產(chǎn)品中文名稱:小鼠乳腺癌細胞
產(chǎn)品英文名稱:Ca759
參考用途:10月齡經(jīng)產(chǎn)615雌性小鼠自發(fā)B型乳腺癌,,瘤細胞懸液同系小鼠皮下移植,移植成功率100%,。制備成細胞懸液接種至615等小鼠,。
形態(tài)特性:上皮細胞樣,圓形,,短梭形
培養(yǎng)基:90%DMEM-H+10%FBS
培養(yǎng)條件:培養(yǎng)溫度37℃,;氣體環(huán)境5%CO2+95%空氣;
培養(yǎng)方法:復(fù)蘇步驟:①凍存管從液氮或-80℃中取出放入PE手套中,,迅速沒入37℃水浴鍋,,搖晃凍存管加速溶解,以1分鐘內(nèi)全部溶解為宜,;②在超凈臺中將溶解好的細胞液加入到裝有9ml 完全培養(yǎng)基的離心管內(nèi),,1000-1200rpm/min離心5分鐘,棄去上清液,,用1-2mL完全培養(yǎng)基重懸細胞,。③然后將細胞懸液加入到含有5-6mL完全培養(yǎng)基的T25瓶中,放入培養(yǎng)箱培養(yǎng),。細胞傳代:①將舊培養(yǎng)液吸除,,PBS清洗兩遍后,加入1-2mL胰酶(0.25%Trypsin+0.02%EDTA),;②鏡下觀察消化情況,,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(可用吸管吸起些許胰酶輕輕吹打細胞層某處,肉眼可見細胞層脫落,,即消化完成,,否則繼續(xù)消化),直接吸掉胰酶,,加入5-6毫升完全培養(yǎng)基,,輕輕吹打細胞層,把細胞層吹落,,吹散,。③將細胞懸液按1:2比例分到新的T25瓶中,添加適當?shù)耐耆囵B(yǎng)基,,把細胞懸液打勻,,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。④注意培養(yǎng)基pH值變化和細胞密度,,定期換液(每周2-3次),,待細胞密度達到80%-90%時,重復(fù)傳代操作或者凍存,。
存儲形式:液氮
提供形式:凍存管,;T25培養(yǎng)瓶
備注:/
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