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弧菌屬

BNCC340878

Vibrio sp.

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凍干粉；斜面；菌液；平板

北納生物/BNCC

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弧菌屬介紹：

注意：該價(jià)格為凍干粉價(jià)格,平板加200元,斜面加100元,菌液加150元
產(chǎn)品中文名稱：弧菌屬
產(chǎn)品英文名稱：Vibrio sp.
參考用途：研究、質(zhì)量控制。
形態(tài)特性：菌落直徑為1-2mm，圓形，邊緣整齊，不透明，正面黃色，中間凸起，表面光滑，表面明亮，質(zhì)地濕潤(rùn)，易挑起，G－（紅），桿菌
培養(yǎng)基：蛋白胨：5.0，酵母膏：1.0，檸檬酸鐵：0.1，溴化鉀：0.08，NaCl：19.45，MgCl2：5.98，Na2SO4：3.24，CaCl2：1.8，KCl：0.55，Na2CO3：0.16，Na2NO3：0.0016，Na2HPO4：0.008，氯化鍶：0.034，硼酸：0.022，硅酸鈉：0.004，氟化鈉：0.0024，瓊脂：15.0，pH：7.4-7.8（25℃）
培養(yǎng)條件：20℃；24-48h；好氧
培養(yǎng)方法：①準(zhǔn)備上述平板2塊；②安瓿管表面消毒后在安全柜中打開，用酒精燈灼燒頂部，后迅速滴上無菌水使之破裂，隨后用鑷子將其敲碎；③吸取0.5mL無菌水打入凍干管，充分溶解菌粉后，打入2塊平板，200μL/個(gè)，涂布均勻；④將平板置于上述培養(yǎng)條件下培養(yǎng)，菌種長(zhǎng)出即可使用。
存儲(chǔ)形式：2-8℃
提供形式：凍干粉；斜面；菌液；平板
備注：‖描述│G-桿菌，氧化酶陽(yáng)性；精氨酸雙水解酶陽(yáng)性；尿素酶、賴氨酸脫羧酶、鳥氨酸脫羧酶均陰性；吲哚陽(yáng)性，檸檬酸鹽試驗(yàn)陰性；發(fā)酵葡萄糖、甘露糖、蔗糖、甘露醇；不發(fā)酵阿拉伯糖、肌醇。兼性厭氧，最適pH7.4~7.6。血清型O4。

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國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)：《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 副溶血性弧菌檢驗(yàn)》
適用范圍	適用于食品中副溶血性弧菌的定性及定量檢測(cè)，包括水產(chǎn)品、熟肉制品等食品樣本。
核心檢測(cè)方法	采用增菌培養(yǎng)（堿性蛋白胨水）、選擇性分離（TCBS瓊脂）、生化鑒定（氧化酶試驗(yàn)、嗜鹽性試驗(yàn)等）及血清學(xué)試驗(yàn)（O抗原分型）。
檢出限與定量限	定性檢測(cè)最低檢出限為1 CFU/g（或mL）；定量檢測(cè)需通過平板計(jì)數(shù)法，定量限為10 CFU/g（或mL）。
質(zhì)控樣品要求	需使用標(biāo)準(zhǔn)菌株（如ATCC 33847）作為陽(yáng)性對(duì)照，同時(shí)設(shè)置陰性對(duì)照（無菌生理鹽水）；每批次實(shí)驗(yàn)需驗(yàn)證培養(yǎng)基性能。
關(guān)鍵實(shí)驗(yàn)步驟	1. 樣品預(yù)處理與均質(zhì)化；2. 選擇性增菌（37℃±1℃，8-18h）；3. TCBS瓊脂劃線分離（37℃±1℃，18-24h）；4. 可疑菌落純化及生化鑒定；5. 血清凝集試驗(yàn)驗(yàn)證。
特別說明	需嚴(yán)格區(qū)分副溶血性弧菌與其他弧菌屬（如霍亂弧菌）；實(shí)驗(yàn)廢棄物需按生物安全二級(jí)（BSL-2）要求處理。

行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)：《出口食品中致病菌的檢測(cè)方法實(shí)時(shí)熒光PCR法》
適用范圍	適用于食品中副溶血性弧菌的快速篩查，適用于進(jìn)出口檢驗(yàn)及應(yīng)急檢測(cè)場(chǎng)景。
核心檢測(cè)方法	基于tdh和trh毒力基因的實(shí)時(shí)熒光PCR技術(shù)，包含DNA提取、引物探針設(shè)計(jì)、擴(kuò)增程序（50℃ 2min→95℃ 10min→45循環(huán)擴(kuò)增）。
檢出限與定量限	絕對(duì)檢出限為15 CFU/反應(yīng)體系，定量需結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)曲線法，建議與培養(yǎng)法聯(lián)用。
質(zhì)控樣品要求	需包含陰性對(duì)照（無模板對(duì)照）、陽(yáng)性對(duì)照（含目標(biāo)基因的DNA）及內(nèi)標(biāo)對(duì)照（檢測(cè)抑制物），每批次驗(yàn)證擴(kuò)增效率。
關(guān)鍵實(shí)驗(yàn)步驟	1. 樣品前處理與基因組提取；2. PCR反應(yīng)體系配制（防污染措施）；3. 熒光信號(hào)閾值設(shè)定；4. 熔解曲線分析；5. 結(jié)果判讀（Ct值≤35判定為陽(yáng)性）。
特別說明	該方法僅用于初篩，陽(yáng)性結(jié)果需通過分離培養(yǎng)進(jìn)一步確認(rèn)；引物設(shè)計(jì)需避開已知變異位點(diǎn)。

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