人肝癌細(xì)胞
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產(chǎn)品中文名稱：人肝癌細(xì)胞
產(chǎn)品英文名稱：SNU-449
參考用途：/
形態(tài)特性：上皮細(xì)胞樣,，短梭形,，多角形，邊緣不規(guī)則,，單層貼壁生長(zhǎng)
培養(yǎng)基：RPMI-1640完全培養(yǎng)基：90%RPMI-1640+10%FBS
培養(yǎng)條件：培養(yǎng)溫度37℃,；氣體環(huán)境5%CO2+95%空氣；
培養(yǎng)方法：復(fù)蘇步驟：①凍存管從液氮或-80℃冰箱中取出放入PE手套中,，迅速?zèng)]入37℃水浴鍋,，搖晃凍存管加速溶解，以1min內(nèi)全部溶解為宜,；②在超凈臺(tái)中將溶解好的細(xì)胞液加入到裝有9mL完全培養(yǎng)基的離心管內(nèi),，1000-1200rpm離心5min，棄去上清液,，用1-2mL完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,。③將細(xì)胞懸液加入到含有5-6mL完全培養(yǎng)基的T25瓶中，放入培養(yǎng)箱培養(yǎng),。
細(xì)胞傳代：①將舊培養(yǎng)液吸除,，PBS清洗兩遍后，加入1-2mL胰酶（0.25%Trypsin+0.02%EDTA）,；②鏡下觀察消化情況,，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動(dòng)時(shí)（可用吸管吸起些許胰酶輕輕吹打細(xì)胞層某處,，肉眼可見細(xì)胞層脫落,，即消化完成，否則繼續(xù)消化）,，直接吸掉胰酶,，加入5-6mL完全培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層,，把細(xì)胞層吹落,，吹散。③將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的T25瓶中,，添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基,，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。,；④注意培養(yǎng)基pH值變化和細(xì)胞密度，定期換液（每周2-3次），待細(xì)胞密度達(dá)到80%-90%時(shí),，重復(fù)傳代操作或者凍存,。
存儲(chǔ)形式：液氮
提供形式：凍存管；T25培養(yǎng)瓶
備注：別名：SNU449; NCI-SNU-449,。倍增時(shí)間約 36 小時(shí),。SNU-449 于 1990 年由 J.-G. Park 和同事在接受細(xì)胞毒治療前從一名韓國(guó)患者身上采集的原發(fā)性肝細(xì)胞癌。腫瘤細(xì)胞最初在補(bǔ)充有 5% 熱滅活胎牛血清的 ACL-4 培養(yǎng)基中培養(yǎng),。建立后,，將培養(yǎng)物維持在補(bǔ)充有 10% 熱滅活胎牛血清的 RPMI 1640 中?！挲g│52年‖種族│亞洲人‖性別│男性‖核型│非整倍體,；模態(tài)編號(hào) = 57‖注釋│通過Southern印跡雜交檢測(cè)乙型肝炎病毒(HBV) DNA。HBV基因組RNA未表達(dá),。大體上,，原始腫瘤是單個(gè)結(jié)節(jié)狀，伴結(jié)節(jié)周圍擴(kuò)展,。組織學(xué)上，它主要是緊湊型和小梁型,。培養(yǎng)的細(xì)胞含有單核或雙核,。ATCC 證實(shí)該細(xì)胞系對(duì)乙型肝炎病毒 DNA 序列的存在呈陽性。
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