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拉恩氏菌屬

BNCC379395

Rahnella sp.

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凍干粉；斜面；菌液；平板

北納生物/BNCC

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拉恩氏菌屬介紹：

注意：該價(jià)格為凍干粉價(jià)格,平板加200元,斜面加100元,菌液加150元
產(chǎn)品中文名稱：拉恩氏菌屬
產(chǎn)品英文名稱：Rahnella sp.
參考用途：/
形態(tài)特性：菌落直徑為1-2mm，圓形，邊緣整齊，不透明，正面灰白色，中間凸起，表面光滑，表面明亮，質(zhì)地濕潤，G－（紅），桿菌，純度：純
培養(yǎng)基：蛋白胨：10.0，牛肉粉：3.0，氯化鈉：5.0，瓊脂：15.0，pH值：7.3±0.1(25℃)
培養(yǎng)條件：30℃；18-24h；好氧；
培養(yǎng)方法：①準(zhǔn)備上述平板 1-2 塊；②安瓿管表面消毒后在安全柜中打開，用酒精燈灼燒頂部，后迅速滴上無菌水使之破裂，隨后用鑷子將其敲碎；③吸取 0.5mL 無菌水打入凍干管，充分溶解菌粉后，打入平板中 200μL/個(gè)，涂布均勻；④將平板置于上述培養(yǎng)條件下培養(yǎng)，菌種長(zhǎng)出即可使用。
存儲(chǔ)形式：2-8℃
提供形式：凍干粉；斜面；菌液；平板
備注：農(nóng)林學(xué)院朱教授團(tuán)隊(duì)分離于信陽筒鮮魚

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國家標(biāo)準(zhǔn)解讀：拉恩氏菌屬檢測(cè)相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)

標(biāo)準(zhǔn)名稱及標(biāo)準(zhǔn)號(hào)

GB/T 34224-2017《生物產(chǎn)品中病原微生物檢測(cè)方法拉恩氏菌屬的檢測(cè)》

適用范圍

適用于食品、環(huán)境樣本及生物制品中拉恩氏菌屬的定性與定量檢測(cè)，包括分離培養(yǎng)、鑒定及分子生物學(xué)檢測(cè)方法。

核心檢測(cè)方法

1. 選擇性培養(yǎng)基分離法：使用XLD培養(yǎng)基進(jìn)行初篩；
2. PCR檢測(cè)：針對(duì)拉恩氏菌屬特異性基因（如16S rRNA）進(jìn)行擴(kuò)增；
3. 生化鑒定：通過API 20E生化反應(yīng)條驗(yàn)證。

檢出限與定量限

1. 培養(yǎng)法檢出限：10 CFU/g（或mL）；
2. PCR法檢測(cè)下限：1×10² CFU/g（或mL）；
3. 定量限要求：需通過標(biāo)準(zhǔn)曲線驗(yàn)證，最低定量限為1×10³ CFU/g。

質(zhì)控樣品要求

1. 陽性對(duì)照：使用標(biāo)準(zhǔn)菌株（如ATCC 49161）；
2. 陰性對(duì)照：無菌生理鹽水或同類型樣本基質(zhì)；
3. 每批次實(shí)驗(yàn)需包含至少1個(gè)空白對(duì)照及3個(gè)平行樣。

關(guān)鍵實(shí)驗(yàn)步驟

1. 樣本預(yù)處理：均質(zhì)后取25 g加入225 mL緩沖蛋白胨水；
2. 增菌培養(yǎng)：36±1℃下孵育18-24小時(shí)；
3. 選擇性分離：劃線接種至XLD培養(yǎng)基，觀察菌落形態(tài)；
4. 核酸提取：使用試劑盒提取DNA并進(jìn)行PCR驗(yàn)證。

特別說明

1. 實(shí)驗(yàn)人員需具備生物安全二級(jí)（BSL-2）操作資質(zhì)；
2. 分子檢測(cè)中需防止氣溶膠污染；
3. 結(jié)果報(bào)告需包含檢測(cè)方法、檢出限及質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)。

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