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當(dāng)前位置: 首頁(yè) 標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 菌種 培養(yǎng)基 革蘭氏染色液試劑盒/用于細(xì)菌的革蘭氏染色試驗(yàn)
革蘭氏染色液試劑盒/用于細(xì)菌的革蘭氏染色試驗(yàn)_
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革蘭氏染色液試劑盒/用于細(xì)菌的革蘭氏染色試驗(yàn)

HB8278 {{goodObj.price > 0 ? '¥' + goodObj.price : '咨詢'}} ¥{{goodObj.sell_price || 0}} 咨詢 5ml*8 {{inventory}} {{goodObj.date}} hopebio {{item.norm}} 詳見(jiàn)說(shuō)明

操作視頻|革蘭氏染色操作

試劑盒組成:

組成

別名

規(guī)格

配制依據(jù)

溶液A

結(jié)晶紫染色液

5ml*2

將1.0g結(jié)晶紫完全溶解于20ml 95%乙醇,

然后與80ml 1%草酸銨水解液混合,。

溶液B

碘液

5ml*2

將1.0g碘與2.0g碘化鉀混合,,然后加少許

蒸餾水充分振搖,待完全溶解,,再加蒸餾水至300ml,。 

溶液C

95%乙醇

5ml*2

/

溶液D

沙黃復(fù)染液

5ml*2

將0.25g沙黃溶解于10ml95%乙醇中,然后

加90ml蒸餾水稀釋,。

檢驗(yàn)原理:
通過(guò)結(jié)晶紫初染和碘液媒染后,,在細(xì)胞壁內(nèi)形成了不溶于水的結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物,革蘭氏陽(yáng)性菌由于其細(xì)胞壁較厚,、肽聚糖網(wǎng)層次較多且交聯(lián)致密,,故遇乙醇或丙酮脫色處理時(shí),因失水反而使網(wǎng)孔縮小,,再加上它不含類脂,,故乙醇處理不會(huì)出現(xiàn)縫隙,因此,,能把結(jié)晶紫與碘復(fù)合物牢牢留在壁內(nèi),,使其仍呈紫色;而革蘭氏陰性菌因其細(xì)胞壁薄,、外膜層類脂含量高,、肽聚糖層薄且交聯(lián)度差,在遇脫色劑后,,以類脂為主的外膜迅速溶解,,薄而松散的肽聚糖網(wǎng)不能阻擋結(jié)晶紫與碘復(fù)合物的溶出,因此通過(guò)乙醇脫色后仍呈無(wú)色,,再經(jīng)沙黃等紅色染料復(fù)染,,就使革蘭氏陰性菌呈紅色。

產(chǎn)品用法:

1.涂片經(jīng)火焰固定,,加(結(jié)晶紫溶液)溶液A染1分鐘,,用清水沖去染液。

2.加(碘液)溶液B染1分鐘,,水洗,。

3.加(95%乙醇)溶液C,不時(shí)搖動(dòng)玻片約10-30秒,,至無(wú)紫色脫落為止,,水洗。

4.加(沙黃復(fù)染液)溶液D,,染1分鐘,,水洗,。

5.干后油鏡鏡檢。陽(yáng)性菌呈紫色,、陰性菌呈淡紅色,。

革蘭氏染色液試劑盒微生物靈敏度試驗(yàn):

按標(biāo)簽用法制備培養(yǎng)基,接種以下質(zhì)控菌株,,放置/℃/培養(yǎng)/小時(shí),。

革蘭氏染色液質(zhì)控結(jié)果:


以上信息僅供參考,請(qǐng)以實(shí)物批次為準(zhǔn),!

一,、適用范圍

革蘭氏染色液試劑盒主要用于細(xì)菌或真菌的涂片染色,通過(guò)革蘭氏染色法鑒別革蘭氏陽(yáng)性菌(G+)和革蘭氏陰性菌(G-),。適用于臨床標(biāo)本直接涂片檢測(cè),、微生物分類鑒定及科研實(shí)驗(yàn)中細(xì)菌形態(tài)學(xué)觀察[1][3]。

二,、核心檢測(cè)方法

1. 初染:使用結(jié)晶紫溶液對(duì)細(xì)菌涂片進(jìn)行初染,,染色時(shí)間1分鐘。
2. 媒染:碘液作為媒染劑,,與結(jié)晶紫形成復(fù)合物,,增強(qiáng)染色效果,,染色時(shí)間1分鐘,。
3. 脫色:95%酒精或丙酮脫色,根據(jù)涂片厚度控制脫色時(shí)間(20-60秒),。
4. 復(fù)染:使用番紅或品紅溶液復(fù)染,,使脫色后的革蘭氏陰性菌顯紅色[1][3][5]。

三,、檢出限與定量限

檢出限受涂片厚度,、脫色時(shí)間及菌齡影響。脫色時(shí)間需精確控制(10-20秒),,過(guò)短可能導(dǎo)致假陽(yáng)性,,過(guò)長(zhǎng)導(dǎo)致假陰性。推薦使用培養(yǎng)12-24小時(shí)的菌種,,老齡菌可能影響染色結(jié)果[5][7],。

四、質(zhì)控樣品要求

1. 菌種選擇:推薦使用大腸桿菌(革蘭氏陰性)和金黃色葡萄球菌或枯草桿菌(革蘭氏陽(yáng)性)作為對(duì)照,。
2. 涂片要求:菌液不可過(guò)于濃厚,,涂片需均勻干燥,固定時(shí)避免過(guò)熱(以載玻片不燙手為宜)[3][10],。

五,、關(guān)鍵實(shí)驗(yàn)步驟

1. 涂片固定:通過(guò)火焰固定或乙醇自動(dòng)固定,避免過(guò)度加熱。
2. 染色順序:嚴(yán)格遵循初染→媒染→脫色→復(fù)染流程,,水洗后需吸去多余水分,。
3. 脫色控制:根據(jù)涂片厚度動(dòng)態(tài)調(diào)整脫色時(shí)間,避免脫色不足或過(guò)度[3][5][8],。

六,、特別說(shuō)明

1. 假陽(yáng)性/陰性控制:脫色時(shí)間、菌齡,、涂片厚度均可能影響結(jié)果,,需規(guī)范操作。
2. 染色液儲(chǔ)存:結(jié)晶紫,、碘液,、番紅需避光保存(2-8℃),酒精可室溫存放[1][3][7],。

以上信息僅供參考,,請(qǐng)以相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)的原文為準(zhǔn)!

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