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卵黃瓊脂培養(yǎng)基/用于產(chǎn)氣莢膜梭菌的卵磷脂酶試驗(GB/T5750.12-2023 生活飲用水標準)

HB0262-1

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250g

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卵黃瓊脂培養(yǎng)基介紹：

用途:用于產(chǎn)氣莢膜梭菌的卵磷脂酶試驗,。

添加劑：每瓶需配套添加?10盒 HB8295 50%卵黃乳液?使用，每支添加于50ml卵黃瓊脂培養(yǎng)基,。

成分(g/L)：

蛋白胨	15.0
肉浸粉(來自1000ml肉浸液)	3.0
氯化鈉	5.0
瓊脂	15.0
葡萄糖	10.0
pH值7.5±0.1	25℃

檢驗原理蛋白胨和牛肉膏粉提供碳氮源,、維生素和生長因子；葡萄糖提供能源,；氯化鈉維持均衡的滲透壓,；瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑；產(chǎn)氣莢膜梭菌具有卵磷脂酶分解卵磷脂生成不溶性甘油酯形成乳白色的混濁帶,。

用法

稱取本品48.0g,加熱攪拌溶解于1000ml蒸餾水中,121℃高壓滅菌15分鐘,冷至50℃左右時,加入50%卵黃乳液100ml,搖勻,傾入無菌平皿,。

不同細菌在卵黃瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ)上的生長特征：

金黃色葡萄球菌

乳白色菌落，無渾濁帶

產(chǎn)氣莢膜梭菌

乳白至淡黃色菌落,，有較大渾濁帶

卵黃瓊脂培養(yǎng)基原理及現(xiàn)象：

卵磷脂實驗操作視頻：

卵黃瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ)微生物靈敏度試驗:

按標簽用法制備培養(yǎng)基,，接種以下質(zhì)控菌株，放置36±1℃厭氧培養(yǎng)18-24小時,。注：回收率計算時,，用TSC瓊脂做對照培養(yǎng)基。?

卵黃瓊脂培養(yǎng)基同名產(chǎn)品推薦：

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產(chǎn)品貨號	產(chǎn)品名稱	產(chǎn)品規(guī)格	產(chǎn)品說明及用途
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一,、適用范圍

用于唐菖蒲伯克霍爾德氏菌（椰毒假單胞菌酵米面亞種）和產(chǎn)氣莢膜梭菌的卵磷脂酶試驗檢測，適用于食品微生物檢驗及臨床微生物分離培養(yǎng)[1][3],。

二,、核心檢測方法

基于卵磷脂酶分解卵黃中卵磷脂的原理，通過觀察菌落周圍形成的乳白色混濁環(huán)或渾濁帶判定目標菌活性，需配合厭氧培養(yǎng)條件（36±1℃, 24-48h）進行特異性檢測[1][2][6],。

三,、檢出限與定量限

典型檢出限為10-100 CFU/g（依據(jù)樣品類型），定量限需通過標準菌株梯度稀釋驗證,，推薦使用產(chǎn)氣莢膜梭菌HK9051作為陽性對照[6],。

四、質(zhì)控樣品要求

必須包含唐菖蒲伯克霍爾德氏菌CICC10574（4天培養(yǎng)后應(yīng)出現(xiàn)虹彩現(xiàn)象）及產(chǎn)氣莢膜梭菌HK9051（24h內(nèi)形成渾濁帶）,，質(zhì)控菌株傳代不超過5代[1][6],。

五、關(guān)鍵實驗步驟

1. 基礎(chǔ)培養(yǎng)基滅菌（121℃, 15min）,；
2. 無菌添加50%卵黃鹽水懸液（終濃度5-7.5%）,；
3. 傾注平板時溫度嚴格控制在50±2℃；
4. 點種法接種,，避免劃線破壞卵黃分布[2][6],。

六、特別說明

1. 卵黃懸液需經(jīng)70%乙醇表面消毒后無菌取用,；
2. 培養(yǎng)基避光保存（2-25℃）,，開封后需48h內(nèi)使用；
3. 檢測產(chǎn)氣莢膜梭菌時必須同步設(shè)置陰性對照[1][6],。

以上信息僅供參考,，請以相應(yīng)標準的原文為準！