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MUG培養(yǎng)基/用于大腸桿菌測(cè)定

HB5213

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操作視頻｜MUG培養(yǎng)基的使用方法及結(jié)果判斷

用途:用于大腸桿菌測(cè)試。

成分（g/L）：

蛋白胨	10.0g
磷酸二氫鉀	0.9g
磷酸氫二鈉	6.2g
硫酸錳	0.0005g
亞硫酸鈉	0.04g
去氧膽酸鈉	1.0g
硫酸鎂	0.1g
氯化鈉	5.0g
氯化鈣	0.05g
MUG	0.075g
硫酸鋅	0.0005g
pH值	7.3±0.1

檢驗(yàn)原理：

胨提供碳氮源；硫酸銨,、硫酸錳,、硫酸鋅、硫酸鎂,、氯化鈉和氯化鈣提供各種離子可維持均衡的滲透壓及利于目標(biāo)菌的生長(zhǎng),；磷酸二氫鉀和磷酸氫二鈉為緩沖劑；亞硫酸鈉和去氧膽酸鈉為選擇性抑菌劑,。
細(xì)菌的葡萄糖醛酸苷酶在堿性條件下,，作用于4－甲基傘形酮－β－D 葡萄糖醛酸苷（4－Methylumbellifery－β－DGlucuronide簡(jiǎn)稱MUG）的β糖醛酸苷鍵，使其水解,，釋放的4－甲基傘形酮在366nm 紫外燈下產(chǎn)生藍(lán)白色熒光,。97%的大腸埃希氏桿菌、10%的沙門氏菌以及少量的志賀氏菌具有葡萄糖醛酸苷酶,。

用法：

稱取本品23.37克,，加熱攪拌溶解于1000ml蒸餾水中，分裝試管,，每管5ml,，115℃高壓滅菌20分鐘備用。

注:培養(yǎng)基中含少量硫酸鎂,、氯化鈣,，滅菌后可能出現(xiàn)微量沉淀。

MUG培養(yǎng)基中細(xì)菌的生長(zhǎng)特征：

MUG培養(yǎng)基試驗(yàn)原理及試驗(yàn)結(jié)果：

MUG培養(yǎng)基的微生物靈敏度試驗(yàn):

按標(biāo)簽用法制備培養(yǎng)基,，接種以下質(zhì)控菌株,，放置30-35℃需氧培養(yǎng)5-24小時(shí)。

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國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) GB/T 5750.12-2006 解讀

適用范圍	用于多管發(fā)酵法檢測(cè)生活飲用水及其水源水中的大腸埃希氏菌[4]。

核心檢測(cè)方法

基于目標(biāo)菌葡萄糖醛酸苷酶水解MUG產(chǎn)生熒光特性,，通過紫外燈（366nm）觀察藍(lán)白色熒光判定結(jié)果[4],。

檢出限與定量限

檢出限為1 CFU/100ml，定量限通過多管發(fā)酵法的陽(yáng)性管數(shù)換算MPN值[4],。

質(zhì)控樣品要求

需包含陽(yáng)性對(duì)照（如大腸埃希氏菌CMCC(B)44102,，熒光反應(yīng)陽(yáng)性）及陰性對(duì)照（如鼠傷寒沙門氏菌ATCC14028，無熒光）[4],。

關(guān)鍵實(shí)驗(yàn)步驟

1. 培養(yǎng)基配制：稱取37.05g EC-MUG干粉溶于1L蒸餾水,，115℃滅菌20分鐘；
2. 接種與培養(yǎng)：樣品接種后于44.5℃±0.5℃培養(yǎng)24小時(shí),；
3. 結(jié)果觀察：紫外燈下檢測(cè)熒光,，陽(yáng)性樣本顯示藍(lán)白色熒光[4],。

特別說明	1. 培養(yǎng)基需新鮮配制，避免反復(fù)加熱,； 2. 實(shí)驗(yàn)環(huán)境需避光,，防止MUG成分光解； 3. 質(zhì)控需同步進(jìn)行,，確保選擇性（抑制非目標(biāo)菌）與特異性（熒光反應(yīng)準(zhǔn)確）[4],。

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