MUG培養(yǎng)基/用于大腸桿菌測定
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操作視頻|MUG培養(yǎng)基的使用方法及結(jié)果判斷
用途: 用于大腸桿菌測試,。
成分(g/L):
檢驗(yàn)原理:
胨提供碳氮源;硫酸銨,、硫酸錳,、硫酸鋅,、硫酸鎂、氯化鈉和氯化鈣提供各種離子可維持均衡的滲透壓及利于目標(biāo)菌的生長,;磷酸二氫鉀和磷酸氫二鈉為緩沖劑,;亞硫酸鈉和去氧膽酸鈉為選擇性抑菌劑。
細(xì)菌的葡萄糖醛酸苷酶在堿性條件下,,作用于4-甲基傘形酮-β-D 葡萄糖醛酸苷(4-Methylumbellifery-β-DGlucuronide 簡稱MUG)的β糖醛酸苷鍵,,使其水解,釋放的4-甲基傘形酮在366nm 紫外燈下產(chǎn)生藍(lán)白色熒光,。97%的大腸埃希氏桿菌,、10%的沙門氏菌以及少量的志賀氏菌具有葡萄糖醛酸苷酶。
用 法
稱取本品23.37克,,加熱攪拌溶解于1000ml蒸餾水中,,分裝試管,每管5ml,,115℃高壓滅菌20分鐘備用,。
注: 培養(yǎng)基中含少量硫酸鎂、氯化鈣,,滅菌后可能出現(xiàn)微量沉淀,。
以上信息僅供參考,請以實(shí)物批次為準(zhǔn),!
適用范圍
適用于生活飲用水及其水源水中大腸埃希氏菌的檢測,,采用多管發(fā)酵法進(jìn)行定量分析[2]。
核心檢測方法
基于多管發(fā)酵法,,利用MUG(4-甲基傘形酮-β-D-葡萄糖醛酸苷)作為熒光底物,。大腸埃希氏菌的葡萄糖醛酸苷酶水解MUG產(chǎn)生4-甲基傘形酮,在366nm紫外光下觀察藍(lán)白色熒光以確認(rèn)目標(biāo)菌[2],。
檢出限與定量限
檢出限為1 CFU/100ml,,定量限為10 CFU/100ml,滿足生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)對痕量微生物檢測的需求[2],。
質(zhì)控樣品要求
需使用標(biāo)準(zhǔn)菌株(如大腸埃希氏菌CMCC(B)44102)進(jìn)行陽性對照,,同時(shí)以非目標(biāo)菌(如鼠傷寒沙門氏菌ATCC14028和糞腸球菌ATCC29212)驗(yàn)證特異性[2]。
關(guān)鍵實(shí)驗(yàn)步驟
1. 培養(yǎng)基配制:稱取37.05g EC-MUG培養(yǎng)基溶于1L蒸餾水,,115℃滅菌20分鐘,。
2. 接種與培養(yǎng):樣品接種后于44.5℃±0.5℃培養(yǎng)24小時(shí)。
3. 結(jié)果判讀:紫外燈下觀察熒光反應(yīng),,陽性樣本顯示藍(lán)白色熒光[2],。
特別說明
1. 培養(yǎng)基需現(xiàn)配現(xiàn)用,避免反復(fù)加熱,。
2. 實(shí)驗(yàn)需在生物安全柜中進(jìn)行,,防止交叉污染,。
3. 熒光觀察需在暗室環(huán)境下完成,確保結(jié)果準(zhǔn)確性[2],。
以上信息僅供參考,,請以相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)的原文為準(zhǔn)!