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人胃癌細(xì)胞

BNCC337681

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凍存管,；T25培養(yǎng)瓶

北納生物/BNCC

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人胃癌細(xì)胞介紹：

產(chǎn)品中文名稱：人胃癌細(xì)胞
產(chǎn)品英文名稱：MKN-45
參考用途：/
形態(tài)特性：上皮細(xì)胞樣，圓形,，短梭形,，邊緣不規(guī)則，單個(gè)細(xì)胞,，單層貼壁生長,，背景干凈
培養(yǎng)基：90%RPMI-1640+10%FBS
培養(yǎng)條件：37℃；5%CO2+95%空氣,；
培養(yǎng)方法：復(fù)蘇步驟：①凍存管從液氮或-80℃冰箱中取出放入PE手套中,，迅速?zèng)]入37℃水浴鍋，搖晃凍存管加速溶解,，以1min內(nèi)全部溶解為宜,；②在超凈臺(tái)中將溶解好的細(xì)胞液加入到裝有9mL完全培養(yǎng)基的離心管內(nèi)，1000-1200rpm離心5min,，棄去上清液,，用1-2mL完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。③然后將細(xì)胞懸液加入到含有6-8mL完全培養(yǎng)基的T25瓶中,，放入培養(yǎng)箱培養(yǎng),。
細(xì)胞傳代：①將培養(yǎng)液（含懸浮細(xì)胞）吸至離心管中，1000rpm條件下離心5min,，收集細(xì)胞,；②用PBS輕輕潤洗T25瓶兩遍后，加入1-2mL胰酶（0.25%Trypsin+0.02%EDTA）,；鏡下觀察消化情況,，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動(dòng)時(shí)（可用吸管吸起些許胰酶輕輕吹打細(xì)胞層某處,，肉眼可見細(xì)胞層脫落,，即消化完成，否則繼續(xù)消化），直接吸掉胰酶,，加入5-6mL完全培養(yǎng)基,，輕輕吹打細(xì)胞層，把細(xì)胞層吹落,，吹散,。③將上述兩步操作所得細(xì)胞混勻在一起后按1:2比例分到新的T25瓶中，添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基,，把細(xì)胞懸液打勻,，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。④注意培養(yǎng)基pH值變化和細(xì)胞密度,，定期換液（每周2-3次）,，待細(xì)胞密度達(dá)到80%-90%時(shí)，重復(fù)傳代操作或者凍存,。
存儲(chǔ)形式：液氮
提供形式：凍存管,；T25培養(yǎng)瓶
備注：/

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