人胃癌細胞
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產(chǎn)品中文名稱:人胃癌細胞
產(chǎn)品英文名稱:KATO Ⅲ
參考用途:在抗胸腺細胞血清治療的倉鼠的臉頰袋。不,,是裸鼠
形態(tài)特性:上皮細胞樣,,圓形,邊緣不規(guī)則,,多數(shù)聚團,,單層貼壁生長
培養(yǎng)基:90%RPMI-1640/EMEM+10%熱滅活FBS
培養(yǎng)條件:培養(yǎng)溫度37℃;氣體環(huán)境5%CO2+95%空氣;
培養(yǎng)方法:復蘇步驟:①凍存管從液氮或-80℃冰箱中取出放入PE手套中,,迅速沒入37℃水浴鍋,,搖晃凍存管加速溶解,以1min內(nèi)全部溶解為宜,;②在超凈臺中將溶解好的細胞液加入到裝有9mL完全培養(yǎng)基的離心管內(nèi),,1000-1200rpm離心5min,棄去上清液,,用1-2mL完全培養(yǎng)基重懸細胞,。③然后將細胞懸液加入到含有6-8mL完全培養(yǎng)基的T25瓶中,放入培養(yǎng)箱培養(yǎng),。
細胞傳代:①將培養(yǎng)液(含懸浮細胞)吸至離心管中,,1000rpm條件下離心5min,收集細胞,;②用PBS輕輕潤洗T25瓶兩遍后,,加入1-2mL胰酶(0.25%Trypsin+0.02%EDTA);鏡下觀察消化情況,,在細胞邊緣縮小,,貼壁松動時(可用吸管吸起些許胰酶輕輕吹打細胞層某處,肉眼可見細胞層脫落,,即消化完成,,否則繼續(xù)消化),直接吸掉胰酶,,加入5-6mL完全培養(yǎng)基,,輕輕吹打細胞層,把細胞層吹落,,吹散,。③將上述兩步操作所得細胞混勻在一起后按1:2比例分到新的T25瓶中,添加適當?shù)耐耆囵B(yǎng)基,,把細胞懸液打勻,,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。④注意培養(yǎng)基pH值變化和細胞密度,,定期換液(每周2-3次),,待細胞密度達到80%-90%時,重復傳代操作或者凍存,。
存儲形式:液氮
提供形式:凍存管,;T25培養(yǎng)瓶
備注:/
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