人膠質(zhì)瘤細(xì)胞
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產(chǎn)品中文名稱:人膠質(zhì)瘤細(xì)胞
產(chǎn)品英文名稱:LN-229
參考用途:/
形態(tài)特性:上皮細(xì)胞樣,短梭形,邊緣不規(guī)則,,單層貼壁生長,,背景干凈
培養(yǎng)基:DMEM-H完全培養(yǎng)基:90%DMEM-H+10%FBS
培養(yǎng)條件:培養(yǎng)溫度37℃;氣體環(huán)境5%CO2+95%空氣,;
培養(yǎng)方法:復(fù)蘇步驟:①凍存管從液氮或-80℃冰箱中取出放入PE手套中,,迅速沒入37℃水浴鍋,搖晃凍存管加速溶解,,以1min內(nèi)全部溶解為宜,;②在超凈臺中將溶解好的細(xì)胞液加入到裝有9mL完全培養(yǎng)基的離心管內(nèi),1000-1200rpm離心5min,,棄去上清液,,用1-2mL完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。③將細(xì)胞懸液加入到含有5-6mL完全培養(yǎng)基的T25瓶中,,放入培養(yǎng)箱培養(yǎng),。
細(xì)胞傳代:①將舊培養(yǎng)液吸除,PBS清洗兩遍后,,加入1-2mL胰酶(0.25%Trypsin+0.02%EDTA),;②鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,,貼壁松動時(可用吸管吸起些許胰酶輕輕吹打細(xì)胞層某處,,肉眼可見細(xì)胞層脫落,即消化完成,,否則繼續(xù)消化),,直接吸掉胰酶,加入5-6mL完全培養(yǎng)基,,輕輕吹打細(xì)胞層,,把細(xì)胞層吹落,吹散,。③將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的T25瓶中,,添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。;④注意培養(yǎng)基pH值變化和細(xì)胞密度,,定期換液(每周2-3次),,待細(xì)胞密度達(dá)到80%-90%時,重復(fù)傳代操作或者凍存,。
存儲形式:液氮
提供形式:凍存管,;T25培養(yǎng)瓶
備注:/
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