AML12細(xì)胞完全培養(yǎng)基_培養(yǎng)基_菌種_標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)_萘析商城

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AML12細(xì)胞完全培養(yǎng)基

BNCC342626

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500mL/瓶

北納生物/BNCC

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AML12細(xì)胞完全培養(yǎng)基介紹：

產(chǎn)品中文名稱：AML12細(xì)胞完全培養(yǎng)基
產(chǎn)品英文名稱：/
參考用途：89%DMEM-H/F-12+10%FBS+1%ITS Liquid Media Supplement+40 ng/ml Dexamethasone
形態(tài)特性：澄清透明，淡紅色
培養(yǎng)基：89%DMEM-H/F-12+10%FBS+1%ITS Liquid Media Supplement+40ng/ml Dexamethasone
培養(yǎng)條件：/
培養(yǎng)方法：①準(zhǔn)備：將移液槍、50mL離心管、100mL血清瓶、超凈工作臺(tái)紫外線照射20min；37℃恒溫水浴預(yù)熱基礎(chǔ)培養(yǎng)基；②配制：火焰滅菌基礎(chǔ)培養(yǎng)基瓶口和血清瓶口，將10%FBS，1%ITS Liquid Media Supplement，40ng/ml Dexamethasone血清懸空倒入 89%基礎(chǔ)培養(yǎng)基中；③封口：用封口膜密封培養(yǎng)液瓶口，貼上對(duì)應(yīng)的產(chǎn)品標(biāo)簽，培養(yǎng)液放回4℃冰箱中。酒精擦拭超凈臺(tái)，熄滅火焰，紫外照射30min；
存儲(chǔ)形式：2-8℃避光保存，有效期一個(gè)月
提供形式：500mL/瓶
備注：89%DMEM-H/F-12+10%FBS+1%ITS Liquid Media Supplement+40 ng/ml Dexamethasone

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標(biāo)準(zhǔn)名稱及標(biāo)準(zhǔn)號(hào)

GB/T 38506-2020《動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中微生物檢測(cè)方法》

適用范圍

適用于動(dòng)物細(xì)胞（如AML12細(xì)胞）培養(yǎng)過(guò)程中微生物污染的檢測(cè)，包括細(xì)菌、真菌、支原體等，確保培養(yǎng)基及細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)的無(wú)菌性。

核心檢測(cè)方法

1. 直接培養(yǎng)法：通過(guò)接種培養(yǎng)液至微生物培養(yǎng)基，觀察微生物生長(zhǎng)。
2. PCR法：檢測(cè)支原體特異性DNA片段。
3. 熒光染色法：使用DNA熒光染料快速篩查微生物污染。

檢出限與定量限

1. 直接培養(yǎng)法：細(xì)菌/真菌檢出限為1 CFU/mL。
2. PCR法：支原體檢出限為10 copies/μL。
3. 熒光染色法：微生物污染定性檢測(cè)，無(wú)定量要求。

質(zhì)控樣品要求

1. 陽(yáng)性對(duì)照：使用標(biāo)準(zhǔn)菌株（如大腸桿菌ATCC 25922）。
2. 陰性對(duì)照：無(wú)菌培養(yǎng)基或已知無(wú)污染細(xì)胞樣本。
3. 實(shí)驗(yàn)環(huán)境需符合生物安全二級(jí)（BSL-2）要求。

關(guān)鍵實(shí)驗(yàn)步驟

1. 取樣：取1 mL培養(yǎng)基或細(xì)胞懸液，避免交叉污染。
2. 微生物培養(yǎng)：分別接種于硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基（厭氧菌）和胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基（需氧菌），37°C培養(yǎng)14天。
3. PCR擴(kuò)增：提取樣本DNA后進(jìn)行支原體特異性引物擴(kuò)增。

特別說(shuō)明

1. 支原體污染需優(yōu)先采用PCR法以縮短檢測(cè)周期。
2. 直接培養(yǎng)法中若14天內(nèi)培養(yǎng)基渾濁則判定為污染陽(yáng)性。
3. 實(shí)驗(yàn)廢棄物需經(jīng)高壓滅菌處理。

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