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當(dāng)前位置: 首頁(yè) 標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 菌種 培養(yǎng)基 RMA細(xì)胞培養(yǎng)基
RMA細(xì)胞培養(yǎng)基_
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RMA細(xì)胞培養(yǎng)基

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RMA細(xì)胞培養(yǎng)基介紹:

產(chǎn)品中文名稱(chēng):RMA細(xì)胞培養(yǎng)基
產(chǎn)品英文名稱(chēng):/
參考用途:/
形態(tài)特性:/
培養(yǎng)基:90%RPMI-1640+10%小牛血清
培養(yǎng)條件:/
培養(yǎng)方法:/
存儲(chǔ)形式:2-8°保存,有效期一個(gè)月
提供形式:500mL/瓶
備注:/

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標(biāo)準(zhǔn)名稱(chēng)及標(biāo)準(zhǔn)號(hào)
GB/T 37864-2019《生物技術(shù) 細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中支原體污染的檢測(cè)方法》
適用范圍
本標(biāo)準(zhǔn)適用于細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中支原體污染的檢測(cè),包括貼壁細(xì)胞、懸浮細(xì)胞及其培養(yǎng)基的污染篩查。
核心檢測(cè)方法
1. DNA熒光染色法:通過(guò)特異性熒光染料結(jié)合支原體DNA進(jìn)行顯色檢測(cè);
2. PCR法:基于支原體特異性基因序列的擴(kuò)增分析。
檢出限與定量限
DNA熒光染色法檢出限為10^3 CFU/mL,PCR法檢出限為10^2 CFU/mL;定量限需通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)法確定。
質(zhì)控樣品要求
1. 陽(yáng)性對(duì)照:需使用已知支原體菌株(如M. orale或A. laidlawii);
2. 陰性對(duì)照:使用未污染細(xì)胞培養(yǎng)基;
3. 每批次檢測(cè)需包含對(duì)照樣品。
關(guān)鍵實(shí)驗(yàn)步驟
1. 樣品預(yù)處理:離心富集支原體并提取DNA;
2. 熒光染色步驟需避光操作;
3. PCR擴(kuò)增需設(shè)置無(wú)模板對(duì)照(NTC)以防止假陽(yáng)性。
特別說(shuō)明
1. 熒光染色法可能受細(xì)胞碎片干擾,需結(jié)合顯微鏡觀察判定結(jié)果;
2. PCR法需定期驗(yàn)證引物特異性;
3. 實(shí)驗(yàn)廢棄物需按生物安全二級(jí)(BSL-2)要求處理。

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