人B淋巴細(xì)胞
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產(chǎn)品中文名稱:人B淋巴細(xì)胞
產(chǎn)品英文名稱:GM12878
參考用途:/
形態(tài)特性:淋巴母細(xì)胞樣,圓形,多數(shù)聚團(tuán),單個細(xì)胞
培養(yǎng)基:RPMI-1640完全培養(yǎng)基:90%RPMI-1640+10%FBS
培養(yǎng)條件:37℃;5%CO2+95%空氣;
培養(yǎng)方法:復(fù)蘇步驟:①凍存管從液氮或-80℃冰箱中取出放入PE手套中,迅速沒入37℃水浴鍋,搖晃凍存管加速溶解,以1min內(nèi)全部溶解為宜;②在超凈臺中將溶解好的細(xì)胞液加入到裝有9mL完全培養(yǎng)基的離心管內(nèi),1000-1200rpm離心3-5min,棄去上清液,用1-2mL完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。③然后將細(xì)胞懸液加入到含有6-7mL完全培養(yǎng)基的T25瓶中,放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶建議豎著培養(yǎng)。
細(xì)胞傳代:①離心法:收集細(xì)胞,1000rpm離心5min,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含8mL培養(yǎng)基的T25瓶中。②半量換液法:可選擇半量換液方式;請將上清培養(yǎng)基輕輕吸走一半,將剩余留有細(xì)胞沉淀的培養(yǎng)基重懸混勻,將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含8mL培養(yǎng)基的T25瓶中。③注意培養(yǎng)基pH值變化和細(xì)胞密度,定期換液(每周2-3次),待細(xì)胞密度達(dá)到大于2×106個/mL時,重復(fù)傳代操作或者凍存。
存儲形式:液氮
提供形式:凍存管;T25培養(yǎng)瓶
備注:供體受試者在 CYP2C19 基因 (CYP2C19*2) 的外顯子 5 的核苷酸 681 處有一個單 bp(G-to-A)轉(zhuǎn)換,這會產(chǎn)生一個異常剪接位點。這一變化改變了 mRNA 從 215 位氨基酸開始的閱讀框,并在下游 20 位氨基酸處產(chǎn)生了一個過早的終止密碼子,導(dǎo)致一種截斷的、無功能的蛋白質(zhì)。由于剪接位點異常,外顯子 5 開始處(從 bp 643 到 682 bp)發(fā)生 40 bp 缺失,導(dǎo)致 215 至 227 氨基酸缺失。截短的蛋白質(zhì)有 234 個氨基酸,將失去催化活性因為它缺少血紅素結(jié)合區(qū)。
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