人B淋巴瘤細(xì)胞
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產(chǎn)品中文名稱:人B淋巴瘤細(xì)胞
產(chǎn)品英文名稱:Ramos
參考用途:EBV陰性;表達(dá)IL-4受體和低親和性IgE受體(CD23);每個(gè)細(xì)胞表面大約有1500個(gè)IL-4的結(jié)合位點(diǎn);分泌IgM(lamdaL);表達(dá)膜型和分泌型的免疫球蛋白。
形態(tài)特性:淋巴母細(xì)胞樣,圓形,單個(gè)細(xì)胞,背景干凈,無(wú)空泡
培養(yǎng)基:90%RPMI-1640+10%FBS
培養(yǎng)條件:培養(yǎng)溫度37℃;氣體環(huán)境5%CO2+95%空氣;
培養(yǎng)方法:復(fù)蘇步驟:①凍存管從液氮或-80℃中取出放入PE手套中,迅速?zèng)]入37℃水浴鍋,搖晃凍存管加速溶解,以1分鐘內(nèi)全部溶解為宜;②在超凈臺(tái)中將溶解好的細(xì)胞液加入到裝有9ml 完全培養(yǎng)基的離心管內(nèi),1000-1200rpm/min離心5分鐘,棄去上清液,用1-2mL完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。③然后將細(xì)胞懸液加入到含有6-8mL完全培養(yǎng)基的T25瓶中,放入培養(yǎng)箱中豎立培養(yǎng)。細(xì)胞傳代:①離心法:收集細(xì)胞,1000rpm條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的T25瓶中。②半量換液法:培養(yǎng)瓶靜置5-10分鐘后,將上清培養(yǎng)基輕輕吸走一半,剩余留有細(xì)胞沉淀的培養(yǎng)基重懸混勻,細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的T25瓶中。③注意培養(yǎng)基pH值變化和細(xì)胞密度,定期換液(每周2-3次),待細(xì)胞密度達(dá)到大于2×106個(gè)/ml時(shí),重復(fù)傳代操作或者凍存。
存儲(chǔ)形式:液氮
提供形式:凍存管;T25培養(yǎng)瓶
備注:該細(xì)胞來(lái)源于一位3歲的白人Burkitt淋巴瘤患者
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