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當(dāng)前位置： 首頁(yè) 標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 菌種 標(biāo)準(zhǔn)菌株 產(chǎn)志賀毒素大腸埃希氏菌
產(chǎn)志賀毒素大腸埃希氏菌_
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產(chǎn)志賀毒素大腸埃希氏菌

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一,、適用范圍

本標(biāo)準(zhǔn)適用于各類(lèi)食品中產(chǎn)志賀毒素大腸埃希氏菌（STEC）的檢驗(yàn)，包括包裝肉制品,、預(yù)包裝生（即）食果蔬制品,、預(yù)包裝奶制品、散裝熟肉制品及初級(jí)農(nóng)產(chǎn)品等[2][7],。

二,、核心檢測(cè)方法

1. 前增菌處理：使用改良胰蛋白胨大豆液體培養(yǎng)基（mTSB）或EC肉湯培養(yǎng)基進(jìn)行樣品前增菌[2][7]
2. 初篩檢測(cè)：通過(guò)實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)檢測(cè)毒力基因stx進(jìn)行初篩[2]
3. 分離培養(yǎng)：陽(yáng)性樣本經(jīng)酸處理及免疫磁珠富集后,，在STEC顯色培養(yǎng)基上進(jìn)行選擇性分離[2][7]

三、檢出限與定量限

本標(biāo)準(zhǔn)未明確列出具體數(shù)值,，需根據(jù)樣品基質(zhì)類(lèi)型及前處理效果進(jìn)行動(dòng)態(tài)評(píng)估[2][7],。

四、質(zhì)控樣品要求

實(shí)驗(yàn)需設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照（含stx基因的STEC標(biāo)準(zhǔn)菌株）和陰性對(duì)照（無(wú)菌生理鹽水）,，全程監(jiān)控培養(yǎng)基滅菌效果及試劑有效性[2][7],。

五、關(guān)鍵實(shí)驗(yàn)步驟

1. 樣品處理：25g樣品與225mL增菌液均質(zhì),，36℃±1℃培養(yǎng)18-24小時(shí)[2]
2. 核酸提?。喝≡鼍弘x心后提取DNA用于PCR檢測(cè)[2]
3. 免疫磁珠富集：陽(yáng)性樣本經(jīng)pH2.5酸性處理1小時(shí)后,，使用特異性磁珠富集目標(biāo)菌[7]
4. 確證實(shí)驗(yàn)：對(duì)分離菌株進(jìn)行生化鑒定及毒力基因復(fù)核[2]

六,、特別說(shuō)明

1. 實(shí)驗(yàn)需在生物安全二級(jí)實(shí)驗(yàn)室（BSL-2）進(jìn)行[2]
2. 顯色培養(yǎng)基需每批次驗(yàn)證選擇性，避免雜菌干擾[7]
3. 實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)需設(shè)置內(nèi)參基因（如uidA）監(jiān)控?cái)U(kuò)增有效性[2]

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