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小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌（GB 4789.28）

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研究,、質(zhì)量控制，《GB 4789.28 培養(yǎng)基和試劑的質(zhì)量要求》標(biāo)準(zhǔn)菌株,。

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適用范圍	適用于食品（包括乳制品,、肉制品等）及食物中毒樣品中小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌的檢測(cè),，涵蓋致病性與非致病性菌株[1][5]
核心檢測(cè)方法	1. 前增菌：25g樣品+225mL改良磷酸鹽緩沖液，26℃±1℃培養(yǎng)48-72h 2. 選擇性分離：CIN-1瓊脂平板與改良Y培養(yǎng)基雙重篩選,，26℃±1℃培養(yǎng)48h 3. 生化鑒定：改良克氏雙糖鐵瓊脂,、尿素酶試驗(yàn)、糖發(fā)酵試驗(yàn)等[1][5][7]
檢出限與定量限	最低檢出限為25g樣品中≥1CFU/g,，定量方法采用平板計(jì)數(shù)法[1][5]
質(zhì)控樣品要求	需設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照（ATCC 23715菌株）和陰性對(duì)照（無(wú)菌生理鹽水）,，每批次檢測(cè)需包含10%平行樣[1][5]
關(guān)鍵實(shí)驗(yàn)步驟	1. 堿處理法：非乳制品需用0.5%KOH處理增菌液 2. 動(dòng)力試驗(yàn)：半固體瓊脂26℃培養(yǎng)觀察動(dòng)力特征 3. 血清學(xué)驗(yàn)證：使用多價(jià)O因子血清進(jìn)行凝集試驗(yàn)[1][5]
特別說(shuō)明	需注意假陽(yáng)性排除：與費(fèi)氏耶爾森菌、中間型耶爾森菌的鑒別需通過(guò)七葉苷水解試驗(yàn)和吡嗪酰胺酶試驗(yàn)[1][5]

適用范圍	針對(duì)出入境口岸的食品,、環(huán)境及生物樣本中致病性小腸結(jié)腸炎耶爾森菌的監(jiān)測(cè)[1]
核心檢測(cè)方法	1. 冷增菌：4℃磷酸鹽緩沖液處理21天 2. 雙重PCR檢測(cè)：靶向ail和virF毒力基因 3. 脈沖場(chǎng)凝膠電泳分型[1]
檢出限與定量限	PCR檢測(cè)靈敏度為102CFU/mL,，適用于痕量樣本檢測(cè)[1]
質(zhì)控樣品要求	要求每20份樣本設(shè)置1份過(guò)程對(duì)照，包含人工污染樣本（103CFU/mL）[1]
關(guān)鍵實(shí)驗(yàn)步驟	1. 樣本預(yù)處理：環(huán)境樣本需用PBS+0.5%吐溫80洗脫 2. 毒力基因檢測(cè)：需同時(shí)擴(kuò)增16S rRNA作為內(nèi)參 3. 生物分型：通過(guò)木糖,、蔗糖發(fā)酵試驗(yàn)劃分生物型[1]
特別說(shuō)明	強(qiáng)調(diào)對(duì)O:3,、O:8、O:9血清型的重點(diǎn)監(jiān)測(cè),，要求檢出菌株需進(jìn)行抗生素敏感性試驗(yàn)[1]

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