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當(dāng)前位置： 首頁 標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 菌種 標(biāo)準(zhǔn)菌株 產(chǎn)腸毒素大腸埃希氏菌
產(chǎn)腸毒素大腸埃希氏菌_
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產(chǎn)腸毒素大腸埃希氏菌

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國家標(biāo)準(zhǔn) GB 4789.6-2016

適用范圍 適用于食品和食物中毒樣品中致瀉大腸埃希氏菌的檢驗，包含產(chǎn)腸毒素大腸埃希氏菌（ETEC）的檢測[6][9]
核心檢測方法 采用MPCR-DHPLC法（多重PCR結(jié)合變性高效液相色譜法）,，可同時檢測腸產(chǎn)毒性,、致病性、出血性及侵襲性大腸埃希氏菌[6]
檢出限與定量限 未明確檢出限,，實際靈敏度取決于樣品前處理與PCR擴增效率
質(zhì)控樣品要求 需包含陽性對照（ETEC標(biāo)準(zhǔn)菌株）和陰性對照（非目標(biāo)菌）,，每批次實驗應(yīng)同步進行質(zhì)控驗證[9]
關(guān)鍵實驗步驟 1. 樣品增菌（EE肉湯，44℃±1℃培養(yǎng)18-24小時）
2. 選擇性分離（CT-SMAC瓊脂平板）
3. PCR擴增毒素基因（LT/ST）
4. 色譜分析驗證擴增產(chǎn)物特異性[6]
特別說明 需在生物安全二級實驗室操作活菌培養(yǎng)物,，PCR檢測應(yīng)在獨立分區(qū)進行以避免污染[9]

國家標(biāo)準(zhǔn) GB 4789.40-2010

適用范圍 食品中致瀉大腸埃希氏菌的系統(tǒng)檢驗,，明確涵蓋產(chǎn)腸毒素型（ETEC）的鑒定[9]
核心檢測方法 基于表型特征與毒素檢測：
1. 生化反應(yīng)鑒定（IMViC試驗）
2. 乳鼠灌胃試驗檢測耐熱腸毒素（ST）
3. Y1腎上腺細胞培養(yǎng)檢測不耐熱腸毒素（LT）[9]
檢出限與定量限 最低檢測限為1 CFU/25g（經(jīng)選擇性增菌后）
質(zhì)控樣品要求 需使用ATCC標(biāo)準(zhǔn)菌株（如ETEC 25922）進行方法驗證,，每季度進行試劑靈敏度驗證
關(guān)鍵實驗步驟 1. 前增菌（緩沖蛋白胨水，36℃±1℃培養(yǎng)18小時）
2. 選擇性增菌（EC肉湯,，44℃±0.5℃培養(yǎng)24小時）
3. 毒素基因PCR檢測（LT/ST引物體系）[9]
特別說明 對疑似產(chǎn)毒菌株需進行動物試驗復(fù)核,，實驗動物應(yīng)符合倫理審查要求

行業(yè)標(biāo)準(zhǔn) SN/T 2797-2011

適用范圍 進出口食品中致瀉大腸埃希氏菌的快速檢測，重點針對腸產(chǎn)毒性大腸桿菌（ETEC）的篩查[8]
核心檢測方法 多重PCR結(jié)合熔解曲線分析,，可同時檢測LT-I,、LT-II、ST1,、ST2等毒素編碼基因[8]
檢出限與定量限 最低檢測濃度為10^3 CFU/mL（未經(jīng)富集樣品）
質(zhì)控樣品要求 每批次需包含試劑空白對照,、陰性基質(zhì)對照及陽性菌株對照（如ETEC H10407）
關(guān)鍵實驗步驟 1. 核酸快速提取（磁珠法）
2. 實時熒光PCR擴增（探針法）
3. 熔解曲線分析判定毒素亞型[8]
特別說明 適用于口岸快速通關(guān)檢驗,，全程檢測時間≤8小時,，陽性結(jié)果需傳統(tǒng)培養(yǎng)法確認

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