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大腸埃希氏菌（GB 4789.28）

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《GB 4789.28 培養(yǎng)基和試劑的質(zhì)量要求》標準菌株

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GB 4789.6-2016 食品安全國家標準食品微生物學(xué)檢驗致瀉大腸埃希氏菌檢驗

適用范圍
本標準適用于食品中致瀉大腸埃希氏菌（包括EPEC、EIEC,、ETEC,、EHEC、EAEC等5類致病型）的檢驗,，涵蓋食品生產(chǎn),、流通及監(jiān)管環(huán)節(jié)的微生物安全控制[5]。

核心檢測方法
采用“預(yù)增菌-選擇性分離-生化鑒定-血清分型-PCR驗證”四步法：
1. 改良EC肉湯增菌培養(yǎng)（44.5℃±0.2℃, 18-24h）
2. MAC/CT-SMAC平板分離
3. IMViC生化試驗（吲哚,、MR-VP,、檸檬酸鹽）
4. O157:H7等特定血清型凝集試驗
5. stx1/stx2等毒力基因PCR檢測[5]

檢出限與定量限
? 定性檢測：25g(mL)樣品中≥1CFU/g(mL)
? MPN定量法：最低檢出限0.03MPN/g（三管法）
? 平板計數(shù)法：定量限102CFU/g（需驗證基質(zhì)干擾）[5]

質(zhì)控樣品要求
? 陽性對照：ATCC 25922標準菌株
? 陰性對照：大腸埃希氏菌非致病株
? 每批次檢測需包含10%平行樣
? 培養(yǎng)基質(zhì)控：TSI斜面應(yīng)呈黃色（產(chǎn)酸）/紅色（不發(fā)酵）雙對照[5]

關(guān)鍵實驗步驟
1. 樣品處理：無菌均質(zhì)（30s-2min）后按1:9比例接種預(yù)增菌液
2. 選擇性增菌：EC肉湯44.5℃培養(yǎng)18h，觀察產(chǎn)氣情況
3. 分離培養(yǎng)：CT-SMAC平板篩選O157菌落（無色半透明）
4. 血清學(xué)試驗：O157多價診斷血清玻片凝集
5. 確證實驗：VITEK 2 Compact或API 20E生化鑒定系統(tǒng)[5]

特別說明
1. 貝類樣品需延長增菌時間至24h并增加堿性處理步驟
2. 冷凍樣品檢驗前需37℃快速復(fù)溫（≤15min）
3. 可疑菌落需在TSA平板上純化后再進行生化鑒定
4. PCR檢測應(yīng)包含內(nèi)標對照排除抑制物干擾[5]

以上信息僅供參考,，請以相應(yīng)標準的原文為準,！

大腸埃希氏菌（GB 4789.28）

GB 4789.6-2016 食品安全國家標準 食品微生物學(xué)檢驗 致瀉大腸埃希氏菌檢驗

GB 4789.6-2016 食品安全國家標準食品微生物學(xué)檢驗致瀉大腸埃希氏菌檢驗