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大腸埃希氏菌（GB 4789.6）_
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大腸埃希氏菌（GB 4789.6）

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B12檢定菌,?！禛B 4789.6-2016致瀉大腸埃希氏菌檢驗(yàn)》陰性對(duì)照菌株。

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GB 4789.6-2016 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 致瀉大腸埃希氏菌檢驗(yàn)

適用范圍本標(biāo)準(zhǔn)適用于食品中致瀉大腸埃希氏菌（包括EPEC,、EIEC、ETEC,、EHEC等亞型）的定性檢測(cè),，特別針對(duì)可能引發(fā)腸道感染的致病性菌株[5][9],。
核心檢測(cè)方法1. 增菌培養(yǎng)：采用改良胰蛋白胨大豆液體培養(yǎng)基（mTSB）進(jìn)行選擇性增菌,；
2. 分離鑒定：通過(guò)STEC顯色培養(yǎng)基與PCR技術(shù)聯(lián)合檢測(cè)志賀毒素基因（stx1/stx2）[5][10]。
檢出限與定量限定性檢測(cè)方法,，檢出限為25g樣品中≥1CFU,。定量檢測(cè)需結(jié)合MPN法，最低定量限為3.0 CFU/g[5][7],。
質(zhì)控樣品要求每批次實(shí)驗(yàn)需包含陰性對(duì)照（無(wú)菌生理鹽水）和陽(yáng)性對(duì)照（ATCC 25922標(biāo)準(zhǔn)菌株）,，樣品處理需在生物安全二級(jí)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行[5][9]。
關(guān)鍵實(shí)驗(yàn)步驟1. 樣品預(yù)處理：25g樣品+225mL緩沖蛋白胨水均質(zhì),；
2. 選擇性增菌：44.5℃培養(yǎng)18-24小時(shí),；
3. 核酸提取：使用磁珠法富集目標(biāo)DNA,；
4. 實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)：包含stx1/stx2,、eae、hlyA等靶標(biāo)基因[5][10],。
特別說(shuō)明1. 貝類樣品需延長(zhǎng)增菌時(shí)間至48小時(shí),；
2. 陽(yáng)性結(jié)果需經(jīng)生化確認(rèn)（IMViC試驗(yàn)：++--或-+--）；
3. 血清學(xué)分型需使用O157:H7特異性抗血清[5][9],。

GB 4789.38-2023 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 大腸埃希氏菌計(jì)數(shù)

適用范圍適用于食品衛(wèi)生指標(biāo)菌計(jì)數(shù),，排除貝類產(chǎn)品。包含MPN法（第一法）和平板計(jì)數(shù)法（第二法）[2][7],。
核心檢測(cè)方法1. MPN法：LST肉湯發(fā)酵試驗(yàn)結(jié)合EC肉湯驗(yàn)證,；
2. 平板計(jì)數(shù)法：使用VRB-MUG培養(yǎng)基，44.5℃培養(yǎng)24小時(shí)后觀察熒光反應(yīng)[2][7],。
質(zhì)控要求培養(yǎng)基需進(jìn)行靈敏度驗(yàn)證（ATCC 25922）,，每批次實(shí)驗(yàn)需包含空白對(duì)照，溫度偏差需≤0.5℃[2][9],。

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