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當(dāng)前位置： 首頁 標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 菌種 生物指示物 大腸埃希氏菌25123工作菌株/YY/T 0689-2008《血液和體液防護(hù)裝備 防護(hù)服材料抗血液傳播病原體穿透性能測(cè)試 Phi-X174噬菌體試驗(yàn)方法》；YY/T 1497-2016 醫(yī)用防護(hù)口罩材料病毒過濾效率評(píng)價(jià)測(cè)試方法Phi-X174菌體測(cè)試方法,；YY/T1777-2021男用避孕套合成材料避孕套技術(shù)要求與試驗(yàn)方法
大腸埃希氏菌25123工作菌株/YY/T 0689-2008《血液和體液防護(hù)裝備 防護(hù)服材料抗血液傳播病原體穿透性能測(cè)試 Phi-X174噬菌體試驗(yàn)方法》；YY/T 1497-2016 醫(yī)用防護(hù)口罩材料病毒過濾效率評(píng)價(jià)測(cè)試方法Phi-X174菌體測(cè)試方法,；YY/T1777-2021男用避孕套合成材料避孕套技術(shù)要求與試驗(yàn)方法_
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大腸埃希氏菌25123工作菌株/YY/T 0689-2008《血液和體液防護(hù)裝備 防護(hù)服材料抗血液傳播病原體穿透性能測(cè)試 Phi-X174噬菌體試驗(yàn)方法》,；YY/T 1497-2016 醫(yī)用防護(hù)口罩材料病毒過濾效率評(píng)價(jià)測(cè)試方法Phi-X174菌體測(cè)試方法,；YY/T1777-2021男用避孕套合成材料避孕套技術(shù)要求與試驗(yàn)方法

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噬菌體Phi X174宿主菌,，配套A0250使用

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GB 4789.6-2016 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 致瀉大腸埃希氏菌檢驗(yàn)

適用范圍
本標(biāo)準(zhǔn)適用于食品中致瀉大腸埃希氏菌的檢驗(yàn),，包括EPEC（腸道致病性）、EIEC（腸道侵襲性）等五種致病型[4],。
核心檢測(cè)方法
采用選擇性培養(yǎng)基分離結(jié)合PCR技術(shù),，包括增菌培養(yǎng)、生化鑒定及血清學(xué)試驗(yàn),，PCR儀用于特異性基因片段擴(kuò)增[4],。
檢出限與定量限
檢測(cè)靈敏度為1 CFU/25g，定量方法依賴平板計(jì)數(shù)法與實(shí)時(shí)熒光定量PCR聯(lián)合判定[4],。
質(zhì)控樣品要求
需使用標(biāo)準(zhǔn)菌株（如ATCC 35150）作為陽性對(duì)照,，陰性對(duì)照需排除交叉污染，每批次實(shí)驗(yàn)需包含空白對(duì)照[4],。
關(guān)鍵實(shí)驗(yàn)步驟
1. 樣品預(yù)處理與選擇性增菌（36℃±1℃, 18-24h）,；
2. 分離培養(yǎng)（MAC/EMB瓊脂）；
3. 生化鑒定（吲哚,、MR-VP試驗(yàn)）,；
4. PCR檢測(cè)毒力基因（stx1/stx2等）[4]。
特別說明
需區(qū)分不同致病型的毒力因子,，如EHEC需檢測(cè)志賀毒素基因,，實(shí)驗(yàn)人員需具備生物安全二級(jí)防護(hù)資質(zhì)[4]。

GB 4789.38—xxxx 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 大腸埃希氏菌計(jì)數(shù)（征求意見稿）

適用范圍
適用于食品及其加工環(huán)境中大腸埃希氏菌的定量檢測(cè),，包括生鮮食品,、預(yù)包裝食品及加工器具表面樣品[1]。
核心檢測(cè)方法
基于平板計(jì)數(shù)法,，采用ChromID?大腸桿菌顯色培養(yǎng)基,，結(jié)合β-葡萄糖醛酸酶活性檢測(cè)[1]。
檢出限與定量限
最低檢出限為1 CFU/g（mL）,，定量范圍10-300 CFU/平板,，超出范圍需梯度稀釋[1]。
質(zhì)控樣品要求
每批次需包含標(biāo)準(zhǔn)菌株ATCC 25922作為陽性對(duì)照,，并設(shè)置基質(zhì)加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)（回收率≥70%）[1],。
關(guān)鍵實(shí)驗(yàn)步驟
1. 樣品均質(zhì)與十倍梯度稀釋；
2. 選擇性平板接種（37℃±1℃, 24h±2h）,；
3. 典型菌落計(jì)數(shù)（藍(lán)色/綠色菌落）,；
4. 確證試驗(yàn)（氧化酶陰性、IMViC++--）[1]。
特別說明
顯色培養(yǎng)基需進(jìn)行適應(yīng)性驗(yàn)證,，冷凍樣品需在45℃內(nèi)快速解凍,，檢測(cè)報(bào)告需注明未經(jīng)驗(yàn)證的方法學(xué)偏差[1]。

SN/T 5225-2019 進(jìn)出口食品中五種致瀉大腸埃希氏菌快速檢測(cè)方法 多重PCR法

適用范圍
針對(duì)進(jìn)出口食品中EHEC,、ETEC,、EPEC、EIEC,、EAEC五類致瀉菌的快速篩查,，檢測(cè)周期≤8h[2][4]。
核心檢測(cè)方法
多重PCR技術(shù)同步檢測(cè)lt/stx/eae等毒力基因,，擴(kuò)增體系包含內(nèi)標(biāo)控制,，電泳判定需出現(xiàn)特異性條帶[2][4]。
檢出限與定量限
純菌DNA檢測(cè)限為10 pg/μL,，食品基質(zhì)中靈敏度達(dá)10^3 CFU/g[2][4],。
質(zhì)控樣品要求
每批次需包含非目標(biāo)菌（如沙門氏菌）作為特異性對(duì)照，擴(kuò)增內(nèi)標(biāo)需顯示正常條帶排除抑制[2][4],。
關(guān)鍵實(shí)驗(yàn)步驟
1. 快速DNA提?。ㄖ蠓蟹ǎ?br>2. 多重PCR擴(kuò)增（95℃預(yù)變性5min,，35循環(huán)）,；
3. 瓊脂糖凝膠電泳分析（1.5%凝膠，100V 40min）[2][4],。
特別說明
需注意引物二聚體干擾,，陽性結(jié)果需經(jīng)測(cè)序確認(rèn)，方法不適用于死菌檢測(cè)[2][4],。

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