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不動桿菌屬_
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不動桿菌屬

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不動桿菌屬


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1. 適用范圍

適用于臨床樣本,、環(huán)境樣本及食品中不動桿菌屬的分離鑒定及耐藥性檢測，重點(diǎn)針對鮑曼不動桿菌,、醋酸鈣不動桿菌等常見致病菌的實(shí)驗(yàn)室檢測流程[3],。

2. 核心檢測方法

生化鑒定法：通過氧化酶陰性、觸酶陽性,、硝酸鹽還原陰性等特性進(jìn)行初步篩選[3],。

分子檢測法：采用熒光定量PCR技術(shù)，針對16S rRNA或特異性基因片段進(jìn)行快速鑒定[6],。

3. 檢出限與定量限

培養(yǎng)法：最低檢出限為102 CFU/mL（血平板或麥康凱培養(yǎng)基）[3],。

熒光定量PCR：定量限為101~103 copies/μL（需驗(yàn)證引物特異性）[6],。

4. 質(zhì)控樣品要求

陽性對照：使用ATCC 19606（鮑曼不動桿菌標(biāo)準(zhǔn)菌株）驗(yàn)證檢測體系準(zhǔn)確性。

陰性對照：需包含大腸埃希菌（ATCC 25922）等非目標(biāo)菌以排除交叉反應(yīng)[3][6],。

5. 關(guān)鍵實(shí)驗(yàn)步驟

樣本前處理：臨床樣本需在30分鐘內(nèi)接種于血平板,，35℃需氧培養(yǎng)18~24小時[3]。

核酸提?。?/strong>采用蛋白酶K裂解法提取DNA,，確保A260/280比值為1.8~2.0[6]。

6. 特別說明

鮑曼不動桿菌在42℃環(huán)境下仍可生長,，此特性可用于區(qū)分其他不動桿菌屬菌種[3],；熒光定量PCR需設(shè)置熔解曲線分析以避免非特異性擴(kuò)增[6]。

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