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放線菌培養(yǎng)基(改良高氏1號(hào))_
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放線菌培養(yǎng)基(改良高氏1號(hào))

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放線菌培養(yǎng)基(改良高氏1號(hào))


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一,、適用范圍

改良高氏1號(hào)培養(yǎng)基適用于放線菌的分離培養(yǎng)及形態(tài)觀察,，尤其在中性偏堿性、有機(jī)質(zhì)豐富的土壤樣本中具有針對(duì)性[1][4],。其合成配方能有效抑制細(xì)菌和霉菌生長(zhǎng),，適用于實(shí)驗(yàn)室環(huán)境下的純培養(yǎng)研究。

二、核心檢測(cè)方法

采用稀釋倒平板法：樣品經(jīng)無(wú)菌水稀釋后,，取1mL菌懸液加入培養(yǎng)基,，搖勻后培養(yǎng)36-48小時(shí)（27-30℃）。通過(guò)菌落計(jì)數(shù)評(píng)估放線菌密度,，優(yōu)先選擇30-100菌落數(shù)的稀釋級(jí)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析[4][6],。

三、檢出限與定量限

檢測(cè)靈敏度為1×101 CFU/g（基于1:10系列稀釋法）,。定量限取決于培養(yǎng)基成分穩(wěn)定性,，建議在滅菌后4小時(shí)內(nèi)完成接種以避免淀粉水解影響[4][8]。

四,、質(zhì)控樣品要求

需驗(yàn)證培養(yǎng)基成分的化學(xué)純度：可溶性淀粉不得含還原糖（斐林試劑檢測(cè)陰性）,，無(wú)機(jī)鹽需達(dá)到分析純級(jí)。每批次培養(yǎng)基應(yīng)進(jìn)行空白對(duì)照試驗(yàn),，確保無(wú)菌生長(zhǎng)[1][4],。

五、關(guān)鍵實(shí)驗(yàn)步驟

1. 淀粉預(yù)處理：先用冷水調(diào)成糊狀,，再與沸水混合加熱至透明膠體[1][8]
2. 成分溶解順序：依次溶解KNO3,、K2HPO4、MgSO4,，最后加入FeSO4母液[1]
3. pH調(diào)節(jié)：滅菌前調(diào)至7.4-7.6,，使用0.1mol/L NaOH或HCl微調(diào)[8]
4. 滅菌參數(shù)：121℃高壓滅菌20分鐘，避免過(guò)熱導(dǎo)致成分分解[1][4]

六,、特別說(shuō)明

? 滅菌后需加入10%酚溶液（2滴/100mL）以抑制雜菌[1]
? 瓊脂凝固后應(yīng)避免反復(fù)融化,，防止淀粉-瓊脂復(fù)合物結(jié)構(gòu)破壞[8]
? FeSO4需單獨(dú)配制母液，臨用前添加以防氧化沉淀[1][4]
[1] 高氏1號(hào)培養(yǎng)基(觀察放線菌形態(tài)等的合成培養(yǎng)基)-百科 [4] 放線菌檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)版本-文檔下載 [6] 放線菌的選擇培養(yǎng)基-文檔下載 [8] 高氏1號(hào)培養(yǎng)基制備的操作步驟- 儀器信息網(wǎng)

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