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改良EC肉湯(mEC+n)/用于大腸桿菌O157：H7選擇性增菌培養(yǎng)（GB標(biāo)準(zhǔn)）

HB0147-1

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250g

hopebio

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改良EC肉湯(mEC+n)介紹：

用途：用于大腸桿菌O157：H7選擇性增菌培養(yǎng)（GB標(biāo)準(zhǔn)）,。

添加劑：每瓶需配套添加6盒HB0106-1 新生霉素4.5mg使用,；每支添加于225ml改良EC肉湯(mEC+n)中。

成分(g/L)

胰蛋白胨	20.0
乳糖	5.0
三號(hào)膽鹽	1.12
磷酸氫二鉀	4.0
磷酸二氫鉀	1.5
氯化鈉	5.0
pH值6.9±0.1	25℃

檢驗(yàn)原理：

胰蛋白胨提供碳氮源,；氯化鈉可維持均衡的滲透壓,；乳糖是可發(fā)酵的糖類；磷酸氫二鉀和磷酸二氫鉀為緩沖劑,；三號(hào)膽鹽和新生霉素能抑制通常在食品中存在的雜菌,。

用法：

稱取本品36.62g，加熱溶解于1000ml蒸餾水中,，分裝三角瓶,，每瓶225ml，121℃高壓滅菌15分鐘,，冷至50℃以下時(shí),，每225ml培養(yǎng)基中加入一支改良EC肉湯抑菌劑（含新生霉素 4.5mg），混勻,，備用,。

改良EC肉湯微生物質(zhì)控結(jié)果：

a：大腸埃希氏菌，b：大腸埃希氏菌O157，c：金黃色葡萄球菌,，d：空白對(duì)照

改良EC肉湯(mEC+n)微生物靈敏度試驗(yàn)：

按標(biāo)簽用法制備培養(yǎng)基,，接種以下質(zhì)控菌株，放置36±1℃需氧培養(yǎng)18-24小時(shí),。?

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HB0147	mEC肉湯mEC Broth	250g	用于大腸桿菌0157:H7選擇性增菌培養(yǎng)(SN,、USDA-FSIS標(biāo)準(zhǔn))
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HB0121-3	改良山梨醇麥康凱(CT-SMAC)瓊脂Sorbitol MacConkey Agar Base	250g	用于O157菌的選擇性分離培養(yǎng)
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HB0106-1	新生霉素	4.5mg/支*5	每支添加于225ml改良EC（MEC+n）肉湯或mEC肉湯或mTSB肉湯中
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HB9177	mBPWp培養(yǎng)基Modified Buffered Peptone Water with Pyruvate	250g	用于0157:H7選擇性增菌培養(yǎng)

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一、適用范圍

改良EC肉湯(mEC+n)主要用于食品,、水樣等樣品中大腸埃希氏菌O157:H7的選擇性增菌培養(yǎng),，符合GB標(biāo)準(zhǔn)中關(guān)于致病菌檢測(cè)的相關(guān)要求。該培養(yǎng)基通過抑制雜菌生長(zhǎng),，提高目標(biāo)菌的檢出效率[1][5],。

二、核心檢測(cè)方法

采用選擇性增菌法：樣品接種于改良EC肉湯后,，在36±1℃培養(yǎng)18-24小時(shí),，通過觀察產(chǎn)氣及渾濁度變化初步判斷目標(biāo)菌存在，結(jié)合后續(xù)分離鑒定步驟完成檢測(cè)[1][6],。

三,、檢出限與定量限

當(dāng)樣品中目標(biāo)菌濃度≥1 CFU/225ml時(shí)，經(jīng)增菌培養(yǎng)后可被有效檢出,。定量限需結(jié)合后續(xù)平板計(jì)數(shù)法確定,，通常要求增菌后菌液濃度≥10^4 CFU/ml[1][5]。

四,、質(zhì)控樣品要求

需同步進(jìn)行陽性對(duì)照（ATCC35150大腸埃希氏O157菌）和陰性對(duì)照（ATCC25923金黃色葡萄球菌）,。陽性對(duì)照應(yīng)顯示典型產(chǎn)氣特征，陰性對(duì)照不得生長(zhǎng)[1][6],。

五,、關(guān)鍵實(shí)驗(yàn)步驟

1. 稱取36.62g干粉溶于1000ml蒸餾水，121℃滅菌15分鐘
2. 冷卻至50℃后加入4.5mg新生霉素抑菌劑
3. 分裝225ml/瓶,，接種樣品后36±1℃培養(yǎng)18-24小時(shí)[1][5]

六,、特別說明

新生霉素添加需嚴(yán)格控制在50℃以下，避免高溫失效,。培養(yǎng)溫度偏差不得超過±1℃,，否則可能影響選擇效果,。培養(yǎng)基配制后應(yīng)在2-8℃避光保存，有效期15天[1][5],。

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