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Esculin

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國家標準1: 食品安全國家標準 食品微生物學檢驗 金黃色葡萄球菌檢驗
適用范圍 適用于食品中金黃色葡萄球菌的定性檢測,Esculin作為培養(yǎng)基成分用于菌落特征判斷。
核心檢測方法 使用Baird-Parker培養(yǎng)基結(jié)合Esculin水解試驗,通過菌落形態(tài)和生化反應鑒別目標菌。
檢出限與定量限 檢出限為1 CFU/g(定性檢測),定量限為10 CFU/g(需結(jié)合平板計數(shù)法)。
質(zhì)控樣品要求 需使用金黃色葡萄球菌ATCC 25923作為陽性對照,陰性對照為無菌生理鹽水。
關鍵實驗步驟 1. 樣品均質(zhì)與增菌培養(yǎng);2. 選擇性平板分離;3. Esculin水解試驗及凝固酶試驗。
特別說明 Esculin培養(yǎng)基需避光保存,水解陽性反應為黑色菌落周圍出現(xiàn)棕黑色暈圈。
行業(yè)標準1: 出口食品中致病菌檢測方法 實時熒光PCR法
適用范圍 適用于食品中腸球菌屬的快速篩查,Esculin作為反應底物用于熒光PCR檢測體系。
核心檢測方法 基于Esculin水解酶基因設計特異性引物,通過熒光信號判斷目標菌存在。
檢出限與定量限 檢出限為100 CFU/g(直接檢測),定量需結(jié)合增菌培養(yǎng)。
質(zhì)控樣品要求 需包含已知Esculin陽性菌株(如糞腸球菌ATCC 29212)作為反應有效性驗證。
關鍵實驗步驟 1. DNA提取與純化;2. 實時熒光PCR擴增;3. Ct值分析與結(jié)果判定。
特別說明 Esculin相關引物需驗證特異性,避免交叉反應導致假陽性。
國家標準2:GB/T 14926.50-2021 實驗動物 微生物學檢測方法
適用范圍 用于實驗動物中腸球菌的檢測,Esculin作為鑒別培養(yǎng)基關鍵成分。
核心檢測方法 膽汁七葉苷瓊脂培養(yǎng)基培養(yǎng),通過Esculin水解特征確認腸球菌。
檢出限與定量限 定性檢測限為單個菌落形成單位(CFU),不涉及定量分析。
質(zhì)控樣品要求 需設置培養(yǎng)基空白對照及已知陽性菌株(如屎腸球菌ATCC 51559)。
關鍵實驗步驟 1. 樣品稀釋與涂布;2. 37℃厭氧培養(yǎng)24-48小時;3. 觀察黑色沉淀物生成。
特別說明 培養(yǎng)基中膽鹽濃度需嚴格控制在1%,避免抑制目標菌生長。

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