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大腸埃希菌

BNCC125783

Escherichia coli ETEC

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凍干粉；斜面；菌液；平板

北納生物/BNCC

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大腸埃希菌介紹：

注意：該價(jià)格為凍干粉價(jià)格,平板加200元,斜面加100元,菌液加150元
產(chǎn)品中文名稱：大腸埃希菌
產(chǎn)品英文名稱：Escherichia coli ETEC
參考用途：科研及血清定型
形態(tài)特性：菌落直徑為0.5-1mm，圓形，邊緣整齊，不透明，正面黃色，顏色較淺，中間凸起，表面光滑，易挑起，G－（紅），桿菌，純度：純
培養(yǎng)基：蛋白胨：10.0，牛肉粉：3.0，氯化鈉：5.0，瓊脂：15.0，pH值：7.3±0.1(25℃)
培養(yǎng)條件：37℃；18-24h；好氧
培養(yǎng)方法：①準(zhǔn)備上述平板 1-2 塊；②安全柜中打開(kāi)，用酒精燈灼燒頂部，后迅速滴上無(wú)菌水使之破裂，隨后用鑷子將其敲碎；③吸取 0.5mL 無(wú)菌水打入凍干管，充分溶解菌粉后，打入平板中 200μL/個(gè)，涂布均勻；④將平板置于上述培養(yǎng)條件下培養(yǎng)，菌種長(zhǎng)出即可使用。
存儲(chǔ)形式：2-8℃
提供形式：凍干粉；斜面；菌液；平板
備注：‖寄主名稱│豬‖致病對(duì)象│動(dòng)物‖傳播途徑│水平傳播‖采集地│中國(guó)北京市‖描述│中監(jiān)所，C83918北京農(nóng)業(yè)大學(xué)，VID0143，E．C．987。腹瀉新生仔豬。產(chǎn)生ST腸毒素。血清型：O9：K103，987P：NM。血清定型。培養(yǎng)基1，37℃。

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國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 大腸埃希氏菌計(jì)數(shù)

標(biāo)準(zhǔn)名稱及標(biāo)準(zhǔn)號(hào)	GB 4789.38-2012
適用范圍	適用于食品及其加工環(huán)境中大腸埃希氏菌的定量檢測(cè)，包含直接計(jì)數(shù)法和MPN法

核心檢測(cè)方法

1. 直接平板計(jì)數(shù)法：使用選擇性培養(yǎng)基（如VRBA）進(jìn)行培養(yǎng)計(jì)數(shù)；
2. MPN法：通過(guò)三步發(fā)酵法結(jié)合EC肉湯和伊紅美藍(lán)瓊脂確認(rèn)

檢出限與定量限

直接計(jì)數(shù)法：檢出限為1 CFU/g（mL）；MPN法最低檢測(cè)限為3 MPN/g（mL）

質(zhì)控樣品要求

1. 需同步進(jìn)行陽(yáng)性對(duì)照（標(biāo)準(zhǔn)菌株ATCC 25922）和陰性對(duì)照（無(wú)菌生理鹽水）；
2. 培養(yǎng)基需通過(guò)無(wú)菌試驗(yàn)和生長(zhǎng)率驗(yàn)證

關(guān)鍵實(shí)驗(yàn)步驟

1. 樣品均質(zhì)與梯度稀釋（使用0.85%無(wú)菌生理鹽水）；
2. 選擇性培養(yǎng)基傾注培養(yǎng)（36℃±1℃，18-24小時(shí)）；
3. 典型菌落驗(yàn)證（氧化酶試驗(yàn)、吲哚反應(yīng)等）

特別說(shuō)明

1. 檢測(cè)需在生物安全二級(jí)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行；
2. 結(jié)果需排除產(chǎn)氣非大腸埃希氏菌的干擾；
3. 冷凍樣品需在45℃以下快速解凍

行業(yè)標(biāo)準(zhǔn) 食品中大腸埃希氏菌快速檢測(cè)方法

標(biāo)準(zhǔn)名稱及標(biāo)準(zhǔn)號(hào)	SN/T 1895-2007
適用范圍	適用于進(jìn)出口食品中大腸埃希氏菌的快速篩檢（如免疫磁珠-熒光PCR法）

核心檢測(cè)方法

1. 免疫磁珠富集目標(biāo)菌；
2. 熒光PCR技術(shù)檢測(cè)uidA基因（β-葡萄糖醛酸酶基因）

檢出限與定量限

最低檢測(cè)限為10 CFU/g（mL），定量需結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)曲線

質(zhì)控要求

1. 每批次需包含PCR抑制物對(duì)照；
2. 磁珠捕獲效率需≥70%

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