人肝癌細(xì)胞
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漢坦病毒S基因假病毒核糖核酸液體室內(nèi)質(zhì)控品
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豬丹毒桿菌脫氧核糖核酸液體室內(nèi)質(zhì)控品
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產(chǎn)品中文名稱:人肝癌細(xì)胞
產(chǎn)品英文名稱:SNU-398
參考用途:大體上,原始腫瘤是單個(gè)結(jié)節(jié)狀,,伴結(jié)節(jié)周圍擴(kuò)展,。組織學(xué)上為小梁型。培養(yǎng)的細(xì)胞是多核的,,并維持原始腫瘤中所見的胞質(zhì)內(nèi)透明小球的產(chǎn)生,。通過Southern印跡雜交檢測(cè)乙型肝炎病毒(HBV) DNA。HBV基因組RNA未表達(dá),。
形態(tài)特性:上皮細(xì)胞樣,,短梭形,多角形,,圓形,,邊緣不規(guī)則,,單層貼壁生長(zhǎng)
培養(yǎng)基:90%RPMI-1640+10%FBS
培養(yǎng)條件:37℃;5%CO2+95%空氣,;
培養(yǎng)方法:復(fù)蘇步驟:①凍存管從液氮或-80℃冰箱中取出放入PE手套中,,迅速?zèng)]入37℃水浴鍋,搖晃凍存管加速溶解,,以1min內(nèi)全部溶解為宜,;②在超凈臺(tái)中將溶解好的細(xì)胞液加入到裝有9mL完全培養(yǎng)基的離心管內(nèi),,1000-1200rpm離心5min,,棄去上清液,用1-2mL完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,。③然后將細(xì)胞懸液加入到含有6-8mL完全培養(yǎng)基的T25瓶中,,放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
細(xì)胞傳代:①將培養(yǎng)液(含懸浮細(xì)胞)吸至離心管中,,1000rpm條件下離心5min,,收集細(xì)胞;②用PBS輕輕潤(rùn)洗T25瓶?jī)杀楹?,加?-2mL胰酶(0.25%Trypsin+0.02%EDTA),;鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,,貼壁松動(dòng)時(shí)(可用吸管吸起些許胰酶輕輕吹打細(xì)胞層某處,,肉眼可見細(xì)胞層脫落,即消化完成,,否則繼續(xù)消化),,直接吸掉胰酶,加入5-6mL完全培養(yǎng)基,,輕輕吹打細(xì)胞層,,把細(xì)胞層吹落,吹散,。③將上述兩步操作所得細(xì)胞混勻在一起后按1:2比例分到新的T25瓶中,,添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。④注意培養(yǎng)基pH值變化和細(xì)胞密度,定期換液(每周2-3次),,待細(xì)胞密度達(dá)到80%-90%時(shí),,重復(fù)傳代操作或者凍存。
存儲(chǔ)形式:液氮
提供形式:凍存管,;T25培養(yǎng)瓶
備注:SNU-398 于 1990 年由 J.-G. Park 及其同事來自一名韓國(guó)患者的間變性肝細(xì)胞癌,,該患者曾通過經(jīng)導(dǎo)管動(dòng)脈栓塞治療,,并使用脂質(zhì)醇加阿霉素和絲裂霉素 C 的組合進(jìn)行治療。大體上,,原始腫瘤是單個(gè)結(jié)節(jié)狀,,伴結(jié)節(jié)周圍擴(kuò)展。組織學(xué)上為小梁型,。培養(yǎng)的細(xì)胞是多核的,,并維持原始腫瘤中所見的胞質(zhì)內(nèi)透明小球的產(chǎn)生。通過Southern印跡雜交檢測(cè)乙型肝炎病毒(HBV) DNA,。HBV基因組RNA未表達(dá),。腫瘤細(xì)胞最初在添加有 5% 熱滅活胎牛血清的 ACL-4 培養(yǎng)基中培養(yǎng)。建立后,,培養(yǎng)物維持在補(bǔ)充有10%熱滅活胎牛血清的RPMI 1640中,。
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