人肝癌細胞
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產(chǎn)品中文名稱:人肝癌細胞
產(chǎn)品英文名稱:SK-HEP-1
參考用途:該細胞系是一種合適的轉(zhuǎn)染宿主。
形態(tài)特性:上皮細胞樣,,短梭形,,不規(guī)則形,,邊緣不規(guī)則,單層貼壁生長
培養(yǎng)基:EMEM完全培養(yǎng)基:90%EMEM+10%FBS
培養(yǎng)條件:培養(yǎng)溫度37℃,;氣體環(huán)境5%CO2+95%空氣,;
培養(yǎng)方法:復蘇步驟:①凍存管從液氮或-80℃中取出放入 PE 手套中,迅速沒入 37℃水浴鍋,,搖晃凍存管加速溶解,,以 1 分鐘內(nèi)全部 溶解為宜;②在超凈臺中將溶解好的細胞液加入到裝有 9ml 完全培養(yǎng)基的離心管內(nèi),,1000-1200rpm/min 離心 5 分鐘,,棄去 上清液,用 1-2mL 完全培養(yǎng)基重懸細胞,。③然后將細胞懸液加入到含有 5-6mL 完全培養(yǎng)基的 T25 瓶中,,放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)。 細胞傳代:①將舊培養(yǎng)液吸除,,PBS 清洗兩遍后,,加入 1-2mL 胰酶(0.25%Trypsin+0.02%EDTA);②鏡下觀察消化情況,, 在細胞邊緣縮小,,貼壁松動時(可用吸管吸起些許胰酶輕輕吹打細胞層某處,肉眼可見細胞層脫落,,即消化完成,,否則繼續(xù) 消化),直接吸掉胰酶,,加入 5-6 毫升完全培養(yǎng)基,,輕輕吹打細胞層,把細胞層吹落,,吹散,。③將細胞懸液按 1:2 比例分到 新的 T25 瓶中,添加適當?shù)耐耆囵B(yǎng)基,,把細胞懸液打勻,,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。④注意培養(yǎng)基 pH 值變化和細胞密度,,定期換 液(每周 2-3 次),,待細胞密度達到 80%-90%時,重復傳代操作或者凍存,。
存儲形式:液氮
提供形式:凍存管,;T25培養(yǎng)瓶
備注:/
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