人胚腎細胞
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N-Fmoc-3-哌啶酮
Y99884-5g | 98%
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N-Fmoc-3-哌啶酮
Y99884-1g | 98%
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1-(N-乙氧羰基)-3-甲氧基-4-哌啶酮
Y99676-5g | 97%
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1-(N-乙氧羰基)-3-甲氧基-4-哌啶酮
Y99676-1g | 97%
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1-烯丙氧羰基-4-哌啶酮
Y98894-5g | 98%
產(chǎn)品中文名稱:人胚腎細胞
產(chǎn)品英文名稱:293T/17
參考用途:/
形態(tài)特性:上皮細胞樣,,短梭形,,邊緣不規(guī)則,單層貼壁生長
培養(yǎng)基:293T/17細胞專用培養(yǎng)基:88%DMEM-H+10%FBS+1%谷氨酰胺+1%NEAA
培養(yǎng)條件:37℃,;5%CO2+95%空氣,;
培養(yǎng)方法:復(fù)蘇步驟:①凍存管從液氮或-80℃冰箱中取出放入PE手套中,迅速沒入37℃水浴鍋,,搖晃凍存管加速溶解,,以1min內(nèi)全部溶解為宜,;②在超凈臺中將溶解好的細胞液加入到裝有9mL完全培養(yǎng)基的離心管內(nèi),1000-1200rpm離心5min,,棄去上清液,,用1-2mL完全培養(yǎng)基重懸細胞。③將細胞懸液加入到含有5-6mL完全培養(yǎng)基的T25瓶中,,放入培養(yǎng)箱培養(yǎng),。
細胞傳代:①將舊培養(yǎng)液吸除,PBS清洗兩遍后,,加入1-2mL胰酶(0.25%Trypsin+0.02%EDTA),;②鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,,貼壁松動時(可用吸管吸起些許胰酶輕輕吹打細胞層某處,,肉眼可見細胞層脫落,即消化完成,,否則繼續(xù)消化),,直接吸掉胰酶,加入5-6mL完全培養(yǎng)基,,輕輕吹打細胞層,,把細胞層吹落,吹散,。③將細胞懸液按1:2比例分到新的T25瓶中,,添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基,把細胞懸液打勻,,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。;④注意培養(yǎng)基pH值變化和細胞密度,,定期換液(每周2-3次),,待細胞密度達到80%-90%時,重復(fù)傳代操作或者凍存,。
存儲形式:液氮
提供形式:凍存管,;T25培養(yǎng)瓶
備注:293T/17細胞株是293T (293tsA1609neo)細胞株的衍生株。 293T 是293細胞株插入了SV40 T-antigen的溫度敏感基因形成的高轉(zhuǎn)衍生株,。 293T細胞進行克隆,,檢測pBND和pZAP載體,得到一株能生成高滴度感染逆轉(zhuǎn)錄病毒的衍生株,,293T/17,。 細胞持續(xù)表達猿病毒40(SV40)大T抗原,而因其高轉(zhuǎn)染能力篩選到17號克隆,。 293T/17細胞用pCRIPenv-和pCRIPgag-2載體轉(zhuǎn)染得到ANJOU 65 細胞株,。 ANJOU 65細胞再用pCRIPgag-2 和 pGPT2E載體轉(zhuǎn)染得到親宅性外殼表達細胞株BOSC 23,。ANJOU 65細胞用攜帶gpt抗性基因的pCRIPAMgag載體轉(zhuǎn)染得到Bing 雙向性表達包裝細胞株。
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