人胚腎細(xì)胞
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漢坦病毒S基因假病毒核糖核酸液體室內(nèi)質(zhì)控品
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產(chǎn)品中文名稱：人胚腎細(xì)胞
產(chǎn)品英文名稱：HEK293S GnTI-
參考用途：/
形態(tài)特性：上皮細(xì)胞樣,，多角形，邊緣不規(guī)則,，單層貼壁生長(zhǎng)
培養(yǎng)基：DMEM-H/F12完全培養(yǎng)基：90%DMEM-H/F12+10%FBS
培養(yǎng)條件：培養(yǎng)溫度37℃,；氣體環(huán)境5%CO2+95%空氣；
培養(yǎng)方法：復(fù)蘇步驟：①凍存管從液氮或-80℃冰箱中取出放入PE手套中,，迅速?zèng)]入37℃水浴鍋,，搖晃凍存管加速溶解，以1min內(nèi)全部溶解為宜,；②在超凈臺(tái)中將溶解好的細(xì)胞液加入到裝有9mL完全培養(yǎng)基的離心管內(nèi),，1000-1200rpm離心5min,，棄去上清液，用1-2mL完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,。③將細(xì)胞懸液加入到含有5-6mL完全培養(yǎng)基的T25瓶中,，放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
細(xì)胞傳代：①將舊培養(yǎng)液吸除，PBS清洗兩遍后,，加入1-2mL胰酶（0.25%Trypsin+0.02%EDTA）,；②鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動(dòng)時(shí)（可用吸管吸起些許胰酶輕輕吹打細(xì)胞層某處,，肉眼可見(jiàn)細(xì)胞層脫落，即消化完成,，否則繼續(xù)消化），直接吸掉胰酶,，加入5-6mL完全培養(yǎng)基,，輕輕吹打細(xì)胞層，把細(xì)胞層吹落,，吹散,。③將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的T25瓶中，添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基,，把細(xì)胞懸液打勻,，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。,；④注意培養(yǎng)基pH值變化和細(xì)胞密度,，定期換液（每周2-3次），待細(xì)胞密度達(dá)到80%-90%時(shí),，重復(fù)傳代操作或者凍存,。
存儲(chǔ)形式：液氮
提供形式：凍存管,；T25培養(yǎng)瓶
備注：有STR鑒定報(bào)告,。 支原體陰性，Hek293sGNTIˉ細(xì)胞不具有正乙酰氨基葡萄糖轉(zhuǎn)移酶I(GNTI)活性，因此缺乏復(fù)雜的正葡萄糖,，因此該細(xì)胞系已成功地用于多種哺乳動(dòng)物膜蛋白的過(guò)度表達(dá)。在最初的出版物中有兩個(gè)版本的hek293sGNTIˉ細(xì)胞,。一個(gè)是hek293sGNTIˉ(ATCCCRL-3022)，另一個(gè)是用四環(huán)素誘導(dǎo)系統(tǒng)構(gòu)建的hek293sGNTIˉ變異體,。CRL-3022不含四環(huán)素誘導(dǎo)系統(tǒng)或pcdna6-tr載體. 與HEK293S是親本關(guān)系,，HEK293S與HEK293是親本關(guān)系。
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