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1. 標(biāo)準(zhǔn)名稱及標(biāo)準(zhǔn)號
GB/T 16631-2019《高效液相色譜法通則》
2. 適用范圍
適用于采用C18反相色譜填料進(jìn)行分離的化學(xué)物質(zhì)定性定量分析,包括藥物、食品、環(huán)境樣品中有機(jī)物的檢測。
3. 核心檢測方法
基于反相色譜分離原理,采用C18填料色譜柱,以梯度或等度洗脫方式分離目標(biāo)物,通過紫外檢測器或質(zhì)譜檢測器進(jìn)行檢測。
4. 檢出限與定量限
紫外檢測器檢出限一般為0.01-0.1 μg/mL,定量限為0.05-0.5 μg/mL;質(zhì)譜檢測器靈敏度更高,檢出限可達(dá)pg/mL級。
5. 質(zhì)控樣品要求
需包含空白對照、加標(biāo)回收樣品和平行樣,加標(biāo)濃度應(yīng)覆蓋定量限至標(biāo)準(zhǔn)曲線最高點(diǎn),回收率需滿足80%-120%。
6. 關(guān)鍵實驗步驟
① 流動相需經(jīng)0.45 μm濾膜過濾并脫氣;
② 色譜柱使用前需用高比例有機(jī)相活化平衡;
③ 進(jìn)樣體積根據(jù)檢測器靈敏度優(yōu)化;
④ 梯度洗脫需設(shè)定平衡時間確保重現(xiàn)性。
7. 特別說明
① C18填料粒徑需與儀器壓力匹配(常規(guī)3 μm或5 μm);
② 酸性/堿性化合物分析需調(diào)節(jié)流動相pH值;
③ 實驗溫度應(yīng)控制在色譜柱耐受范圍內(nèi)(通常≤60℃)。

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