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當(dāng)前位置: 首頁 標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 菌種 標(biāo)準(zhǔn)菌株 河流弧菌/研究,、質(zhì)量控制
河流弧菌/研究、質(zhì)量控制_
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河流弧菌/研究、質(zhì)量控制

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研究、質(zhì)量控制

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SN/T 2564-2010 水產(chǎn)品中致病性弧菌檢測 MPCR-DHPLC法

適用范圍
適用于水產(chǎn)品中河流弧菌、副溶血弧菌等致病性弧菌的同步檢測,,涵蓋魚類,、貝類等生鮮及加工制品[7]。
核心檢測方法
采用多重PCR(MPCR)結(jié)合變性高效液相色譜(DHPLC)技術(shù),,通過特異性引物擴(kuò)增目標(biāo)基因片段,,利用色譜峰差異實現(xiàn)快速鑒定[7][10]。
檢出限與定量限
最低檢出限為103 CFU/g,,定量限為104 CFU/g,,滿足水產(chǎn)品中痕量污染的檢測需求[7]。
質(zhì)控樣品要求
需設(shè)置平行樣品及陰性/陽性對照,,每批次檢測需驗證培養(yǎng)基選擇性和核酸提取效率[7][1],。
關(guān)鍵實驗步驟
1. 樣品前處理:25g樣品+225mL堿性蛋白胨水增菌培養(yǎng)(37℃, 8-12h)
2. 核酸提?。褐蠓蟹ɑ蛟噭┖蟹?br>3. MPCR擴(kuò)增:toxR基因特異性引物,退火溫度58℃
4. DHPLC分析:色譜柱溫度60℃,,梯度洗脫分離[7][10],。
特別說明
需嚴(yán)格區(qū)分河流弧菌與溶藻弧菌的交叉反應(yīng),實驗環(huán)境需符合BSL-2級生物安全要求[7][8],。

SN/T 3196-2012 水產(chǎn)品中致病性弧菌檢測 全自動病原菌檢測系統(tǒng)篩選法

適用范圍
針對進(jìn)出口水產(chǎn)品的快速篩查,,適用于檢測河流弧菌等12種常見致病性弧菌[7]。
核心檢測方法
基于全自動微生物鑒定系統(tǒng),,整合生化反應(yīng)數(shù)據(jù)庫和熒光標(biāo)記技術(shù),,實現(xiàn)18小時內(nèi)完成鑒定[7]。
檢出限與定量限
最低檢出濃度為102 CFU/mL,,系統(tǒng)內(nèi)置定量曲線可實現(xiàn)102-107 CFU/mL的線性檢測[7],。
質(zhì)控樣品要求
需定期使用ATCC標(biāo)準(zhǔn)菌株(如ATCC 33812)驗證系統(tǒng)準(zhǔn)確性,每批次檢測含3個濃度梯度質(zhì)控樣[7],。
關(guān)鍵實驗步驟
1. 選擇性增菌:APW培養(yǎng)基42℃培養(yǎng)6h
2. 自動化接種:系統(tǒng)自動完成菌液稀釋與微孔板分裝
3. 熒光檢測:每15分鐘讀取一次代謝產(chǎn)物熒光信號
4. 結(jié)果判讀:基于預(yù)設(shè)的39項生化反應(yīng)特征譜[7],。
特別說明
對陳舊樣品(冷凍>30天)需延長增菌時間至18小時,避免假陰性結(jié)果[7],。

GSO ISO 11348-3:2013 水質(zhì) 發(fā)光細(xì)菌試驗檢測法

適用范圍
適用于河流,、海水等環(huán)境水體中弧菌的生物毒性評估,包括河流弧菌的代謝活性檢測[3],。
核心檢測方法
使用凍干發(fā)光細(xì)菌(如明亮發(fā)光桿菌)與待測樣本反應(yīng),,通過發(fā)光強(qiáng)度變化計算抑制率[3][7]。
檢出限與定量限
可檢測0.1-100mg/L的污染物濃度,,發(fā)光強(qiáng)度變化率與毒性物質(zhì)濃度呈線性相關(guān)(R2≥0.95)[3],。
質(zhì)控樣品要求
每批次需測試ZnSO4標(biāo)準(zhǔn)溶液(EC50=5-15mg/L)驗證系統(tǒng)靈敏度[3]。
關(guān)鍵實驗步驟
1. 細(xì)菌復(fù)蘇:2% NaCl溶液活化凍干菌粉(15℃, 30min)
2. 暴露反應(yīng):樣本與菌懸液等體積混合(20℃, 15min)
3. 發(fā)光測定:酶標(biāo)儀檢測490nm波長發(fā)光值[3],。
特別說明
水樣需預(yù)過濾(0.22μm)去除懸浮物干擾,,鹽度需調(diào)節(jié)至2.0±0.2%[3]。

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