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24176-HQF大腸埃希氏菌定量標(biāo)準(zhǔn)菌株/GB 17378.7-2007 海洋監(jiān)測(cè)規(guī)范第7部分：近海污染生態(tài)調(diào)查和生物監(jiān)測(cè)

C0122

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海水糞大腸菌群檢測(cè)陽性對(duì)照,、培養(yǎng)基檢驗(yàn)（濾膜法）

以上信息僅供參考,，請(qǐng)以實(shí)物批次為準(zhǔn)！

GB 4789.38-2012 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 大腸埃希氏菌計(jì)數(shù)

適用范圍

本標(biāo)準(zhǔn)適用于食品中大腸埃希氏菌的定量檢測(cè),，包括食品生產(chǎn),、加工、儲(chǔ)存及銷售環(huán)節(jié)的衛(wèi)生監(jiān)控[8],。第二法（平板計(jì)數(shù)法）不適用于貝類產(chǎn)品,。

核心檢測(cè)方法

采用平板計(jì)數(shù)法（第二法）和最大可能數(shù)法（MPN法）。平板法基于選擇性培養(yǎng)基（如VRBA）進(jìn)行菌落計(jì)數(shù),；MPN法通過三步發(fā)酵法（LST肉湯初發(fā)酵,、BGLB肉湯復(fù)發(fā)酵）結(jié)合統(tǒng)計(jì)學(xué)估算菌濃度[8]。

檢出限與定量限

平板法檢測(cè)范圍為10 CFU/g（mL）至10⁵ CFU/g（mL）,；MPN法可檢測(cè)低至3 MPN/g（mL）,。定量結(jié)果需根據(jù)樣品稀釋梯度與陽性管數(shù)查MPN表計(jì)算[8]。

質(zhì)控樣品要求

需同步進(jìn)行空白對(duì)照（生理鹽水）和陽性對(duì)照（標(biāo)準(zhǔn)菌株CMCC(B)44102）,。樣品需均質(zhì)化處理,，固體樣品稀釋液需靜置2分鐘以釋放菌體[8],。

關(guān)鍵實(shí)驗(yàn)步驟

1. 樣品制備：25g（mL）樣品+225mL稀釋液均質(zhì)；
2. 接種：選擇3個(gè)連續(xù)稀釋度,，每梯度接種3管LST肉湯（MPN法）或傾注VRBA平板（平板法）；
3. 培養(yǎng)：LST肉湯36℃±1℃培養(yǎng)24h±2h,，BGLB肉湯36℃±1℃培養(yǎng)48h±2h,；VRBA平板36℃±1℃培養(yǎng)18h-24h[8]。

特別說明

1. 貝類樣品因存在共生菌干擾,，禁用平板法,；
2. 產(chǎn)氣量不足的BGLB管需延長(zhǎng)培養(yǎng)至72h再判定；
3. 實(shí)驗(yàn)環(huán)境需符合生物安全二級(jí)（BSL-2）要求[8],。

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24176-HQF大腸埃希氏菌定量標(biāo)準(zhǔn)菌株/GB 17378.7-2007 海洋監(jiān)測(cè)規(guī)范 第7部分：近海污染生態(tài)調(diào)查和生物監(jiān)測(cè)

GB 4789.38-2012 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 大腸埃希氏菌計(jì)數(shù)

24176-HQF大腸埃希氏菌定量標(biāo)準(zhǔn)菌株/GB 17378.7-2007 海洋監(jiān)測(cè)規(guī)范第7部分：近海污染生態(tài)調(diào)查和生物監(jiān)測(cè)