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標準名稱及標準號
GB 5009.85-2016《食品安全國家標準 食品中維生素B?的測定》
適用范圍
適用于食品中維生素B?(包括游離態(tài)和結合態(tài))的定量檢測,涵蓋乳制品、谷物、嬰幼兒配方食品等基質。
核心檢測方法
高效液相色譜法(HPLC)結合熒光檢測器,通過樣品酶解、提取、凈化后進樣分析,以保留時間和熒光特征峰定性,外標法定量。
檢出限與定量限
檢出限為0.05 mg/kg(以固體樣品計),定量限為0.15 mg/kg。液態(tài)樣品需按稀釋比例折算。
質控樣品要求
每批次樣品需包含空白對照、加標回收樣品(加標量為樣品含量的50%-150%)和平行樣(相對偏差≤10%)。
關鍵實驗步驟
1. 樣品酶解:使用木瓜蛋白酶和淀粉酶37℃水解16小時
2. 提取與凈化:鹽酸溶液(pH=4.5)提取,離心后過0.45μm濾膜
3. 色譜條件:C18色譜柱,流動相為甲醇-磷酸鹽緩沖液(15:85),熒光檢測激發(fā)波長440nm,發(fā)射波長565nm
特別說明
維生素B?對光敏感,實驗需避光操作;結合態(tài)維生素B?需酶解轉化為游離態(tài)后檢測,否則會導致結果偏低。

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