克羅諾桿菌顯色培養(yǎng)基/用于嬰兒配方奶粉和其他食品種克羅諾桿菌的快速檢測(GB 4789.40-2024)
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克羅諾桿菌顯色培養(yǎng)基是青島海博生物公司生產(chǎn)的培養(yǎng)基,用于嬰兒配方奶粉和其它食品中克羅諾桿菌的快速檢測,??肆_諾桿菌顯藍(lán) -綠色菌落,其它菌顯無色或黃色,。
用法:
稱取本品6.48g加入200ml蒸餾水,加熱煮沸完全溶解,121℃高壓滅菌15分鐘,冷至50℃左右時,傾入無菌平皿,。
檢驗原理:
胰蛋白胨和酵母浸粉提供氮源,、維生素、生長因子,;氯化鈉維持滲透壓,;瓊脂為凝固劑;脫氧膽酸鈉主要抑制革蘭氏陽性菌的生長,,檸檬酸鐵銨和硫代硫酸鈉可使產(chǎn)硫化氫的非目標(biāo)菌呈現(xiàn)黑色,,阪崎克羅諾桿菌可特異性分解底物5-溴-4-氯-3-吲哚-α-D-吡喃葡糖甙使菌落顯藍(lán)-綠色,其他不產(chǎn)硫化氫,、不分解底物的菌一般顯無色或黃色,。
操作步驟:
1、輕輕混勻mLST-Vm肉湯培養(yǎng)物,用10ul接種環(huán)挑取增菌液劃線接種于克羅諾桿菌顯色培養(yǎng)基平板,接種2個平板; 2、倒置放入培養(yǎng)箱36℃±1℃培養(yǎng)24h±2h,典型的克羅諾桿菌為藍(lán) - 綠色菌落; 3,、挑取可疑菌落劃線接種于TSA平板36℃±1℃培養(yǎng)24h±2h,做PCR鑒定或生化鑒定,。
質(zhì)量控制:
1、外觀
此干燥培養(yǎng)基的粉末均勻,具有良好的流動性,呈淡黃色或乳白色,。制備好的平板呈淡黃色固體培養(yǎng)基,。
2、微生物試驗
質(zhì)控菌株
菌株編號
生長情況
菌落顏色
克羅諾桿菌
ATCC29544
+++
藍(lán)-綠色
金黃色葡萄球菌
ATCC25923
-
-
沙門氏菌
ATCC14028
+++
無色,,有黑色中心
大腸桿菌
ATCC25922
+++
淡黃色
普通變形桿菌
CMCC49027
+++
無色
典型的克羅諾桿菌為藍(lán) -綠色菌落,其它菌為無色,、乳白色或黃色菌落。
貯存:
制備好的平板可保存 2-5 天,應(yīng)避免光線直接照射,。干燥培養(yǎng)基應(yīng)放置于陰暗干燥處,保存溫度 2-8℃,注意避光保存,。
失效:
干燥培養(yǎng)基超過保質(zhì)期、結(jié)塊和顏色變化都不能使用,。
注意:
此培養(yǎng)基僅供實驗室使用,。
以上信息僅供參考,,請以實物批次為準(zhǔn),!
一、適用范圍
二,、核心檢測方法
2. 選擇性增菌:采用改良月桂基硫酸鹽胰蛋白胨肉湯(mLST-V);
3. 分離培養(yǎng):使用克羅諾桿菌顯色培養(yǎng)基(DFI瓊脂),,目標(biāo)菌落呈藍(lán)綠色[4][7][10],。
三、檢出限與定量限
四,、質(zhì)控樣品要求
2. 陰性對照:培養(yǎng)基空白對照;
3. 樣品處理:需無菌均質(zhì),,避免交叉污染[3][7],。
五、關(guān)鍵實驗步驟
2. 選擇性增菌:取1mL轉(zhuǎn)種至mLST-V肉湯,41.5℃±1℃培養(yǎng)24小時,;
3. 分離培養(yǎng):劃線接種顯色培養(yǎng)基,,36℃培養(yǎng)24-48小時觀察藍(lán)綠色菌落[3][4][7]。
六,、特別說明
2. 需結(jié)合生化鑒定(如氧化酶試驗,、糖發(fā)酵試驗)或PCR方法確認(rèn),;
3. 2016版標(biāo)準(zhǔn)新增PCR鑒定方法,2024版刪除了產(chǎn)黃色素等冗余生化指標(biāo)[7][10],。
以上信息僅供參考,,請以相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)的原文為準(zhǔn)!