細(xì)菌L型分離瓊脂/用于血和尿標(biāo)本中L型細(xì)菌的分離培養(yǎng)
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MH瓊脂即用型平板
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改良MRS瓊脂即用型平板
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用途：用于血和尿標(biāo)本中L型細(xì)菌的分離培養(yǎng),。
成分（g/L）
用法：
稱取本品54.0g,，加熱溶解于1000ml蒸餾水中，121℃高壓滅菌15分鐘,，待冷至50℃左右時,，傾入無菌平皿。
細(xì)菌L型分離瓊脂微生物靈敏度試驗(yàn)：
按標(biāo)簽用法制備培養(yǎng)基,，接種以下質(zhì)控菌株,，放置37℃需氧培養(yǎng)18-24小時。
以上信息僅供參考,，請以實(shí)物批次為準(zhǔn),！
GB 4789 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn)
適用于食品及食品加工環(huán)境中細(xì)菌L型的分離培養(yǎng)，用于檢測食品中可能存在的L型細(xì)菌污染[1],。
采用增菌培養(yǎng)后轉(zhuǎn)種L型瓊脂培養(yǎng)基,，結(jié)合菌落形態(tài)觀察及生化鑒定[1][5]。
檢出限為1 CFU/g（液體樣本）或0.1 CFU/cm2（固體表面）,，定量限需根據(jù)樣本類型調(diào)整[1],。
每批次需同步進(jìn)行陽性對照（標(biāo)準(zhǔn)菌株L型）和陰性對照（無菌PBS）實(shí)驗(yàn)[1][7]。
① 樣品前處理：均質(zhì)后加入滲透壓穩(wěn)定劑,；② L型增菌培養(yǎng)（24-48h）,；③ 轉(zhuǎn)種分離瓊脂；④ 典型菌落鑒定[5][7],。
需在生物安全柜內(nèi)操作,，返祖試驗(yàn)必須驗(yàn)證原始菌株特性[7][10]。
GB/T 5750 生活飲用水標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法
適用于飲用水及水源中L型細(xì)菌的監(jiān)測,，特別針對經(jīng)消毒處理后可能存在的細(xì)胞壁缺陷菌[1],。
膜過濾濃縮法結(jié)合高滲瓊脂培養(yǎng)，培養(yǎng)周期需延長至72小時[1][10],。
最低檢出濃度為1 CFU/100mL,，定量范圍10-103 CFU/mL[1]。
每10個樣品需設(shè)置1個過程控制樣,，使用標(biāo)準(zhǔn)菌株ATCC 25922誘導(dǎo)L型作為質(zhì)控菌[1],。
① 0.45μm濾膜過濾；② 濾膜轉(zhuǎn)移至高滲肉湯復(fù)蘇,；③ 雙層瓊脂平板分離,；④ 革蘭染色驗(yàn)證[10]。
需注意余氯對L型細(xì)菌的抑制效應(yīng),，采樣后應(yīng)即時添加硫代硫酸鈉[1][10],。
SN/T 檢驗(yàn)檢疫行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)
進(jìn)出口食品、化妝品中L型細(xì)菌的檢疫要求,，重點(diǎn)關(guān)注β-內(nèi)酰胺類抗生素誘導(dǎo)的細(xì)胞壁缺陷型[1][10],。
兩步篩選法：先用低濃度抗生素篩選，再通過滲透壓梯度平板確認(rèn)[1][5],。
最低報(bào)告閾值為10 CFU/g,，定量線性范圍10-10? CFU/g[1]。
需包含誘導(dǎo)組（抗生素處理）和非誘導(dǎo)組對照，質(zhì)控菌株應(yīng)涵蓋革蘭陽性/陰性代表菌[1][7],。
① 選擇性誘導(dǎo)培養(yǎng),；② L型特征性菌落篩選；③ 細(xì)胞壁染色驗(yàn)證,；④ 返祖實(shí)驗(yàn)確認(rèn)[5][7],。
需記錄培養(yǎng)基滲透壓濃度（推薦3%-5% NaCl梯度），并標(biāo)注誘導(dǎo)劑種類及濃度[1][10],。
以上信息僅供參考,，請以相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)的原文為準(zhǔn)！