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當前位置： 首頁 標準物質 菌種 培養(yǎng)基 酸性羅氏培養(yǎng)基基礎/用于結核桿菌的培養(yǎng)、計數,、保存,、照光試驗、藥物敏感性測定及菌型鑒定等
酸性羅氏培養(yǎng)基基礎/用于結核桿菌的培養(yǎng),、計數,、保存、照光試驗,、藥物敏感性測定及菌型鑒定等_
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酸性羅氏培養(yǎng)基基礎/用于結核桿菌的培養(yǎng),、計數,、保存,、照光試驗、藥物敏感性測定及菌型鑒定等

HB6251-1 {{goodObj.price > 0 ? '￥' + goodObj.price : '咨詢'}} ￥{{goodObj.sell_price || 0}} 咨詢 250g {{inventory}} {{goodObj.date}} hopebio {{item.norm}} 見證書

酸性羅氏培養(yǎng)基基礎介紹：

用途：用于結核桿菌的培養(yǎng),、計數,、保存、照光試驗,、藥物敏感性測定及菌型鑒定等,。

成分(g/600ml)

L-谷氨酸鈉7.2
硫酸鎂0.24
檸檬酸鎂0.6
磷酸二氫鉀14.0
馬鈴薯淀粉30.0
孔雀石綠0.4
用法：

稱取本品52.4g，溶解于600ml 蒸餾水中,加入 12ml甘油混勻,沸水鍋內煮沸30-40 分鐘（其間不斷搖晃）呈糊狀,待冷至 50℃左右時,加入無菌新鮮全卵液 1000ml,混勻分裝試管,放入血清凝固器內,待凝固器內溫度達 85-90℃計時,1-1.5 小時后取出,放冷備用,。

注：培養(yǎng)基中含較多馬鈴薯淀粉,，呈渾濁狀。

用法詳解：

（1）基礎培養(yǎng)基：稱取除全蛋液以外的成分加熱煮沸溶解于600mL純化水中,，加熱過程需不停攪拌以防止馬鈴薯粉凝成塊或糊底,，121℃滅菌15min，冷卻至55℃?zhèn)溆茫?/span>

（2）全蛋液制備：將新鮮雞蛋洗刷外殼后,，浸于5%碳酸鈉溶液中約30min,，用清水沖洗后，浸泡于75%乙醇溶液中數分鐘,，在無菌環(huán)境中用滅菌的鑷子或其他器具打破蛋殼,，將蛋液倒入含玻璃珠的無菌錐形瓶中（可預先將玻璃珠放入錐形瓶中，121℃高壓蒸汽滅菌15-30min）,，充分搖晃使蛋黃,、蛋白搖散混合均勻。

注：新鮮雞蛋內的蛋液通常是無菌的,，無須進行滅菌處理,，操作過程應注意避免污染。若蛋液中可能殘存蛋殼碎渣,，可將打散后的全蛋液用無菌紗布進行過濾,。

（3）將1000mL全蛋液與600mL基礎溶液混合充分搖勻，無菌分裝于滅菌的試管中,，每管5-7mL（視試管的大小調整裝量），擺長斜面,，用85-90℃流動蒸汽滅菌1-1.5h至斜面完全凝固,，取出冷卻后備用。制備好的羅氏培養(yǎng)基斜面應呈微綠色或黃綠色,。

注：不同于一般的培養(yǎng)基,，此培養(yǎng)基中不使用瓊脂，而是通過蛋液的凝固效果制成固體培養(yǎng)基,，因此硬度較低,，且分枝桿菌生長周期長,，為防止培養(yǎng)基過分失水變干，通常使用試管制成斜面使用而不是做成平板（平板通常培養(yǎng)3-5天后會有明顯失水變薄現象,，而分枝桿菌通常需要培養(yǎng)數周的時間）,。將蛋液與基礎培養(yǎng)基混合時，應緩慢倒入輕輕搖勻,，防止產生過多氣泡,。85-90℃的流動蒸汽可以保持蛋液中的維生素不被破壞，也可使用凝固器加溫至85-90℃,，若無流動蒸汽滅菌器和凝固器,，也可使用烘箱調節(jié)至85-90℃使培養(yǎng)基凝固。

酸性羅氏培養(yǎng)基基礎微生物靈敏度試驗:

按標簽用法制備培養(yǎng)基,，接種以下質控菌株,，放置36℃需氧培養(yǎng)14-28天。

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    GB 4789.28-2013 食品安全國家標準 食品微生物學檢驗 培養(yǎng)基和試劑的質量要求

    適用范圍
    本標準適用于食品微生物檢驗中培養(yǎng)基和試劑的性能驗證，包括培養(yǎng)基的物理化學特性,、微生物生長能力及選擇性等要求,。
    核心檢測方法
    1. pH測定：培養(yǎng)基滅菌后pH值需符合規(guī)定范圍（如酸性羅氏培養(yǎng)基pH 5.6±0.2）,。
    2. 微生物生長試驗：使用目標菌株（如乳酸菌）驗證培養(yǎng)基支持生長的能力，抑制非目標菌（如霉菌）,。
    檢出限與定量限
    目標菌在培養(yǎng)基中的最低檢出限為10 CFU/mL,，定量限為100 CFU/mL。需通過梯度稀釋法驗證,。
    質控樣品要求
    質控菌株需包含標準菌株（如ATCC 4356）和實際分離菌株,，驗證培養(yǎng)基的選擇性和靈敏度。
    關鍵實驗步驟
    1. 培養(yǎng)基配制：精確稱量各成分并溶解,，調整pH后高壓滅菌（121℃, 15分鐘）,。
    2. 性能驗證：平行接種目標菌和干擾菌，觀察生長情況及選擇性,。
    特別說明
    酸性羅氏培養(yǎng)基需避光保存,，開封后需密封防潮，有效期一般為3個月,。

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