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硝酸鹽還原試劑盒/用于硝酸鹽還原試驗

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硝酸鹽還原試劑盒介紹：

試劑盒組成：

組成	別名	規(guī)格	配制依據
溶液A	對甲基苯磺酸溶液	5ml*2	在1000mL 5mol/L乙酸中溶解8g對氨基苯磺酸
溶液B	α-萘酚乙酸溶液	5ml*2	在1000mL 5mol/L乙酸中溶解5g α-萘酚

反應原理：

蛋白胨和牛肉粉提供碳源、氮源、維生素和生長因子；某些細菌可利用硝酸鹽產亞硝酸鹽、氨或氮氣。滴加硝酸鹽還原試劑后若試驗菌培養(yǎng)物中有亞硝酸鹽，可與乙酸、對苯氨基苯磺酸和α-萘酚反應生成紅色的N-α-苯胺偶氮苯磺酸。若試驗菌可利用硝酸鹽產亞硝酸鹽進一步轉化為氮氣，則小倒管中會有氣體囤積，判定為陽性。若試驗菌可將亞硝酸鹽轉化為氨，則滴加硝酸鹽還原試劑呈無色反應，此時需加入適量鋅粉證明培養(yǎng)物中是否有未被利用的硝酸鹽存在，若加入鋅粉后為無色則證明無硝酸鹽，則可判斷為陽性。試驗菌不利用硝酸鹽，滴加硝酸鹽還原試劑后為無色，加入鋅粉后變?yōu)榧t色，證明培養(yǎng)物中有未被利用的硝酸鹽被鋅粉還原為亞硝酸鹽產生紅色反應，此時判斷為陰性。

保存條件：2-8℃

操作步驟：

1.培養(yǎng)物接種于硝酸鹽肉湯，36±1℃培養(yǎng)1-5天。

2.加入溶液A和溶液B各2-3滴，混勻。

3.立即觀察結果，也可以放置室溫2-5分鐘觀察結果。

結果判斷：

陽性反應：紅色

陰性反應：不變色（無紅色出現）

注：如出現陰性結果，可再加入鋅粉少許，若出現紅色，則鑒定為陰性結果，若不變色則為陽性結果。

硝酸鹽還原試劑盒微生物靈敏度試驗：

按標簽用法制備培養(yǎng)基，接種以下質控菌株，放置/℃/培養(yǎng)/小時。

硝酸鹽還原試劑盒同名產品推薦：

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國家標準解讀：硝酸鹽還原試驗相關標準

標準名稱及標準號

GB/T 5750.5-2023《生活飲用水標準檢驗方法第5部分：無機非金屬指標》

適用范圍	適用于生活飲用水、水源水及水處理過程中硝酸鹽的檢測，涵蓋水質監(jiān)測、污染源排查等場景。

核心檢測方法

鎘柱還原分光光度法：通過鎘金屬將硝酸鹽還原為亞硝酸鹽，使用分光光度計在540 nm波長處測定吸光度，根據標準曲線定量。

檢出限與定量限

檢出限為0.005 mg/L（以NO₃^--N計），定量限為0.02 mg/L，滿足痕量檢測需求。

質控樣品要求

需同步檢測空白樣、平行樣及加標回收樣，平行樣相對偏差≤10%，加標回收率應控制在85%-115%。

關鍵實驗步驟

1. 樣品預處理（過濾、pH調節(jié)）；
2. 鎘柱活化與流速控制；
3. 顯色反應（磺胺-萘乙二胺法）；
4. 避光靜置15分鐘后比色。

特別說明	1. 鎘柱還原效率需定期驗證（≥95%）； 2. 避免亞硝酸鹽污染干擾； 3. 高氯離子樣品需稀釋后檢測。

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