人淋巴瘤細(xì)胞
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產(chǎn)品中文名稱:人淋巴瘤細(xì)胞
產(chǎn)品英文名稱:Raji
參考用途:該細(xì)胞中含有EBV,需要在二級生物安全柜中操作;可作轉(zhuǎn)染宿主。
形態(tài)特性:淋巴母細(xì)胞樣,圓形,單個細(xì)胞,多數(shù)聚團(tuán)
培養(yǎng)基:RPMI-1640完全培養(yǎng)基:90%RPMI-1640+10%FBS
培養(yǎng)條件:37℃;5%CO2+95%空氣;
培養(yǎng)方法:復(fù)蘇步驟:①凍存管從液氮或-80℃冰箱中取出放入PE手套中,迅速沒入37℃水浴鍋,搖晃凍存管加速溶解,以1min內(nèi)全部溶解為宜;②在超凈臺中將溶解好的細(xì)胞液加入到裝有9mL完全培養(yǎng)基的離心管內(nèi),1000-1200rpm離心3-5min,棄去上清液,用1-2mL完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。③然后將細(xì)胞懸液加入到含有6-7mL完全培養(yǎng)基的T25瓶中,放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶建議豎著培養(yǎng)。
細(xì)胞傳代:①離心法:收集細(xì)胞,1000rpm離心5min,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含8mL培養(yǎng)基的T25瓶中。②半量換液法:可選擇半量換液方式;請將上清培養(yǎng)基輕輕吸走一半,將剩余留有細(xì)胞沉淀的培養(yǎng)基重懸混勻,將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含8mL培養(yǎng)基的T25瓶中。③注意培養(yǎng)基pH值變化和細(xì)胞密度,定期換液(每周2-3次),待細(xì)胞密度達(dá)到大于2×106個/mL時,重復(fù)傳代操作或者凍存。
存儲形式:液氮
提供形式:凍存管;T25培養(yǎng)瓶
備注:Raji細(xì)胞由PulvertaftRJV于1963年從一位11歲黑人男孩的左上頜骨的Burkitt淋巴瘤中分離建立的,是第一個人類造血系統(tǒng)的連續(xù)傳代細(xì)胞,為B細(xì)胞起源。
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