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當(dāng)前位置: 首頁 標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 菌種 標(biāo)準(zhǔn)菌株 單核增生李斯特氏菌(GB 4789.30)
單核增生李斯特氏菌(GB 4789.30)_
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單核增生李斯特氏菌(GB 4789.30)

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研究,、質(zhì)量控制,,《GB 4789.30-2010單核細胞增生李斯特氏菌檢驗》陽性對照菌株,。

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一、適用范圍

GB 4789.30-2016規(guī)定了食品中單核細胞增生李斯特氏菌的三類檢驗方法:
1. 第一法:定性檢驗,,適用于各類食品中目標(biāo)菌的初步篩查,;
2. 第二法:直接計數(shù)法,適用于目標(biāo)菌含量≥100 CFU/g的食品,;
3. 第三法:選擇性計數(shù)法,,適用于目標(biāo)菌含量<100 CFU/g且雜菌含量高的食品(如牛奶、含顆粒物質(zhì)樣品)[1][3],。

二,、核心檢測方法

1. 增菌培養(yǎng):采用李氏增菌肉湯(LB1和LB2)分階段富集目標(biāo)菌;
2. 分離培養(yǎng):使用李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基和PALCAM瓊脂進行選擇性分離,;
3. 生化鑒定:通過溶血試驗(血瓊脂),、動力試驗(SIM培養(yǎng)基)及全自動微生物生化鑒定系統(tǒng)確認[1][2][3]。

三,、檢出限與定量限

1. 定性檢驗(第一法):檢出限為25g樣品中是否存在目標(biāo)菌,;
2. 定量檢驗(第二法/第三法):定量限為1 CFU/g,檢出限根據(jù)稀釋梯度可達0.04 CFU/g[1][4][8]。

四,、質(zhì)控樣品要求

1. 陽性對照:需使用ATCC19111或CMCC54004標(biāo)準(zhǔn)菌株,;
2. 陰性對照:需包含英諾克李斯特氏菌(L. innocua)等干擾菌;
3. 每批次實驗需設(shè)置空白培養(yǎng)基對照及環(huán)境監(jiān)測樣[1][2][4],。

五,、關(guān)鍵實驗步驟

1. 樣品前處理:25g樣品與225mL LB1肉湯均質(zhì),30℃培養(yǎng)24h±2h,;
2. 選擇性增菌:轉(zhuǎn)種至LB2肉湯,,30℃再培養(yǎng)24h±2h;
3. 分離培養(yǎng):劃線接種顯色培養(yǎng)基和PALCAM瓊脂,,30℃培養(yǎng)24-48h,;
4. 鑒定:挑取典型菌落進行β-溶血試驗(血瓊脂36℃培養(yǎng)24h)和CAMP試驗[1][3][4]。

六,、特別說明

1. 第二法不適用于冷凍/高鹽等預(yù)處理食品,;
2. 第三法需結(jié)合胰酶消化步驟消除顆粒物干擾;
3. 溶血試驗需使用綿羊血瓊脂,,并設(shè)置馬紅球菌作為陽性對照[1][4][8],。

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