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馬紅球菌（GB 4789.30）_
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馬紅球菌（GB 4789.30）

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研究,、質(zhì)量控制,，《GB 4789.30-2010單核細(xì)胞增生李斯特氏菌檢驗(yàn)》陰性對(duì)照菌株。

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DB6540/T 022-2023 馬紅球菌PCR檢測(cè)方法解讀

適用范圍
適用于動(dòng)物組織、體液及環(huán)境樣本中馬紅球菌的快速檢測(cè),，特別針對(duì)幼駒、豬,、牛等易感動(dòng)物的臨床樣本診斷[7],。
核心檢測(cè)方法
采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)，基于馬紅球菌特異性基因序列設(shè)計(jì)引物與探針,，通過擴(kuò)增曲線判定結(jié)果,，檢測(cè)靈敏度高于傳統(tǒng)培養(yǎng)法[7]。
檢出限與定量限
檢出限為10拷貝/反應(yīng),，定量限范圍為102~10?拷貝/μL,，可有效區(qū)分低濃度感染樣本與背景污染[7]。
質(zhì)控樣品要求
每批次檢測(cè)需包含陰性對(duì)照（無菌PBS）,、陽性對(duì)照（含馬紅球菌DNA的標(biāo)準(zhǔn)品）及內(nèi)標(biāo)（檢測(cè)抑制物）,，確保擴(kuò)增體系有效性[7]。
關(guān)鍵實(shí)驗(yàn)步驟
1. 樣本預(yù)處理：組織樣本需研磨后提取DNA,，體液樣本離心富集菌體
2. DNA提?。菏褂蒙虡I(yè)化試劑盒，避免抑制劑干擾
3. PCR擴(kuò)增：95℃預(yù)變性5分鐘,，隨后45個(gè)循環(huán)（95℃ 15秒,，60℃ 30秒）
4. 結(jié)果判讀：Ct值≤35且擴(kuò)增曲線呈典型"S"形判定為陽性[7]
特別說明
1. 需在獨(dú)立PCR實(shí)驗(yàn)室操作，防止氣溶膠污染
2. 對(duì)亞臨床感染樣本建議結(jié)合血清學(xué)檢測(cè)
3. 環(huán)境樣本檢測(cè)時(shí)需增加過濾濃縮步驟以提高靈敏度[7]
[7] DB6540/T 022-2023 馬紅球菌PCR檢測(cè)方法

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